Biotin-11-dUTP是一种结构修饰的核苷酸衍生物,广泛应用于分子生物学和生物技术领域。其核心结构是脱氧尿苷三磷酸(dUTP),在脱氧尿苷的糖环上通过11个碳原子的空间臂连接一个生物素分子,使其具备特异性的生物素标记功能。Biotin-11-dUTP的CAS号为86303-25-5,分子量适中,结构稳定,能有效被DNA聚合酶等酶类识别并掺入DNA链中,实现对核酸分子的标记和检测。
化学结构与性质
Biotin-11-dUTP由三部分组成:脱氧尿苷三磷酸(dUTP)、长链空间臂(11个碳原子组成的链段)以及生物素分子。空间臂的设计有效地减小了生物素标记对核苷酸与酶结合位点的空间阻碍,保证了Biotin-11-dUTP在DNA合成过程中的良好掺入效率和酶识别性。生物素作为维生素B7的衍生物,能够高亲和力地结合亲和素、链霉亲和素等蛋白分子,为后续的分子捕获、纯化和信号放大提供了强大的平台。
Biotin-11-dUTP为水溶性分子,适用于多种生物缓冲体系,稳定性较好,适合常规储存于-20°C避光条件下,避免反复冻融以维持其活性。
英文名 Biotin-11-dUTP
CAS号 86303-25-5
分子量 862.67
密度 N/A
沸点 N/A
分子式 C28H45N6O17P3S
熔点 N/A
应用领域
核酸探针制备
Biotin-11-dUTP广泛用于标记DNA探针。在体外DNA合成或PCR扩增过程中,Biotin-11-dUTP可替代部分dTTP掺入到新合成的DNA链中,使得获得的DNA分子带有生物素标记。这些标记的DNA探针能够通过亲和素-生物素系统与酶标记或荧光标记的亲和素结合,进行高灵敏度的杂交检测、原位杂交(FISH)、芯片杂交等应用。
免疫印迹和杂交检测
在Southern blot、Northern blot等分子印迹技术中,使用Biotin-11-dUTP标记的探针与目标核酸结合后,借助亲和素结合酶(如辣根过氧化物酶HRP或碱性磷酸酶AP)实现信号放大与显色,提高检测灵敏度和特异性。
DNA复制与修复研究
由于其能被DNA聚合酶有效掺入,Biotin-11-dUTP成为研究DNA复制、修复以及DNA合成动力学的重要工具。通过标记细胞或体外体系中合成的新DNA片段,科研人员可以追踪DNA合成过程,检测DNA损伤与修复效率。
核酸纯化和富集
生物素的强亲和力使得带有Biotin-11-dUTP的DNA片段可以被亲和素磁珠或柱子特异捕获。此方法常用于核酸的选择性富集、目标序列捕获及下游测序或分析,提供高效便捷的纯化手段。
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