产品名称：C16-PEG-BIOTIN/N3/COOH/DBCO的合成方法

合成方法

C16-PEG-BIOTIN的制备核心是将C16、PEG与生物素通过化学键连接，常用方法包括：

1. 逐步偶联法

步骤：

C16-PEG合成：将十六烷酸（C16）与PEG通过酯化或酰胺化反应连接。

酯化反应：C16与PEG-COOH在EDC/NHS催化下反应，生成C16-PEG-COO-。

酰胺化反应：C16-NH₂与PEG-COOH在EDC/NHS催化下反应，生成C16-PEG-NH-。

生物素偶联：将C16-PEG与生物素-NHS酯在PBS（pH 7.4）中反应，生成C16-PEG-BIOTIN。

纯化：通过透析（截留分子量：3000 Da）或凝胶渗透色谱（GPC）去除未反应原料。

优势：反应条件温和，产物纯度高（>95%）。

2. 点击化学法（SPAAC）

原理：若PEG预先修饰叠氮基（PEG-N₃），可通过无铜点击反应（SPAAC）与二苯并环辛炔（DBCO）修饰的C16（C16-DBCO）及生物素（Biotin-DBCO）连接。

步骤：

C16-DBCO合成：通过酰胺化反应将DBCO连接到C16。

Biotin-DBCO合成：通过酰胺化反应将DBCO连接到生物素。

点击反应：在PBS（pH 7.4）中，C16-DBCO、PEG-N₃与Biotin-DBCO反应，生成C16-PEG-BIOTIN。

优势：反应快速（30分钟内完成），无需催化剂，结合效率高（>90%）。

3. 固相合成法

原理：利用固相载体（如树脂）逐步连接C16、PEG与生物素，适用于大规模生产。

步骤：

树脂活化：将C16通过酯键或酰胺键固定于树脂表面。

PEG延伸：通过重复的偶联-去保护步骤延长PEG链。

生物素偶联：将生物素-NHS酯连接到PEG末端。

切割与纯化：用TFA（三氟乙酸）切割产物，通过HPLC纯化。

优势：产率高（>80%），适合工业化生产。

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