Biotin-11-dUTP,生物素11脱氧尿苷三磷酸的纯化与表征
Biotin-11-dUTP 是一种通过在脱氧尿苷三磷酸(dUTP)分子上引入含有11个碳的柔性链接至生物素的修饰核苷酸,应用于DNA标记与核酸探针的制备。该化合物保留了dUTP的三磷酸结构和碱基识别能力,同时引入的生物素标记可用于后续检测、分离和富集步骤。
在分子克隆、PCR、原位杂交(ISH)以及核酸扩增反应中,Biotin-11-dUTP 可在DNA聚合酶(如Taq、Klenow或T7 DNA聚合酶)作用下被掺入到合成的DNA链中,部分或全部替代dTTP。由于其与生物素结合蛋白(如链霉亲和素)的高亲和性,被标记的核酸序列可在不影响结构稳定性的前提下进行荧光、酶联或亲和素珠子纯化等操作。
Biotin-11-dUTP 的纯化通常采用高效液相色谱(HPLC)进行,使用阴离子交换柱对带有不同磷酸基的核苷酸进行分离。其关键表征指标包括:
质谱分析(MS):确认分子量与完整结构;
核磁共振(NMR):验证核糖和碱基部分结构;
紫外-可见吸收光谱(UV-Vis):检测核酸特征峰(260 nm)及生物素吸收;
电泳分析:在DNA链中掺入后可用琼脂糖凝胶电泳检测迁移率变化。
使用Biotin-11-dUTP标记的核酸探针在杂交检测中可通过链霉亲和素-HRP(辣根过氧化物酶)或链霉亲和素-荧光素共轭物进行信号放大,实现高灵敏度检测。由于其插入位置柔性高且不干扰杂交,适用于染色体定位、转录本检测和微阵列芯片等领域。
产品名称:Biotin-11-dUTP,生物素11脱氧尿苷三磷酸
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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