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AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)的反应条件
发布时间:2025-07-14     作者:axc   分享到:

AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)的反应条件

AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)是一种常用于免疫检测和荧光标记实验的二抗试剂,其荧光染料为Alexa Fluor 488(AF488),激发波长约为495 nm,发射波长为520 nm,具有高亮度、抗光漂白能力强的特点。该抗体通常为多克隆羊源抗鼠IgG抗体,识别小鼠IgG的重链(H)和轻链(L),可与多种小鼠单克隆抗体结合,用于免疫组化、流式细胞术、免疫荧光显微镜等技术中。

在制备过程中,AF488通过其活性酯(如NHS酯)与抗体分子的赖氨酸残基上的伯胺基团反应,形成稳定的共价酰胺键,从而完成标记。反应通常在pH 8.3左右的碳酸盐缓冲液中进行,以确保胺基处于非质子化状态,利于亲核攻击。反应时间控制在0.5至2小时之间,温度保持在室温或4°C以保持抗体活性。标记反应后通过透析或凝胶过滤等方式去除游离染料,确保标记产物纯净。

为获得佳效果,染料与抗体的摩尔比需控制,通常在4:1至10:1之间。标记过度可能导致抗体构象改变、亲和力下降,而标记不足则影响信号强度。终产物应避光保存于含甘油的PBS缓冲液中,并加有防腐剂以防微生物污染。通过紫外-可见光分光光度计可测定蛋白浓度及标记率(Dye/Protein Ratio),进一步优化使用条件。

产品名称:AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。

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