AF 555 tyramide，AF555 酪胺的反应步骤

AF555 Tyramide 是一种酪胺（tyramide）类荧光信号放大试剂，将 Alexa Fluor 555 染料与酪胺结构共价连接，具备高灵敏度与空间分辨率的特点。其核心应用为辣根过氧化物酶（HRP）催化下的TSA（Tyramide Signal Amplification）系统，用于免疫组织化学、原位杂交、和单分子RNA检测等。

反应步骤如下：

1. 初级抗体结合目标分子： 首先将样品（细胞或组织）经固定和封闭处理后，引入与目标分子结合的一抗，识别并特异性结合于靶标。

2. 加入HRP标记的二抗或聚合物复合物： HRP用于催化AF555 Tyramide的氧化激活。为保证信号定位精度，推荐使用亲和力强、非交叉反应的HRP缀合抗体。

3. 引入AF555 Tyramide工作液： 在含H₂O₂的缓冲体系中，AF555 Tyramide在HRP催化下被氧化，转化为高反应性的酚自由基。

4. 共价沉积： 活化的AF555自由基与靠近HRP酶的靶标蛋白中的酪氨酸残基共价结合，形成永久性信号沉积。这种共价结合避免了信号淬灭或脱落，可长期保存样本。

5. 洗涤和成像： 去除多余反应液后，可直接使用荧光显微镜或激光共聚焦成像。AF555 的激发/发射波长为555/565 nm，具有鲜明的橙红色荧光，与AF488、AF647等可组合进行多色成像。

AF555 Tyramide 的反应体系具有高灵敏度（检测信号可放大100倍以上）、低背景、适用于微量靶标的检测，是组织级别分子成像的关键试剂之一。

产品名称：AF 555 tyramide

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23