产品名称：DBCO-PEG-TCO的反应条件优化

操作注意事项

反应条件优化：

pH控制：NHS酯反应需在pH 7-9进行，避免氨基质子化导致反应效率降低。

温度与时间：室温反应4-6小时（DBCO偶联）和2-4小时（TCO偶联）通常足够，延长反应时间可能增加副产物（如DBCO二聚体或TCO异构化）生成。

避光操作：DBCO和TCO均对光敏感，需在暗处进行反应和纯化。

纯化策略选择：

透析法：简单易行，但耗时较长，适合初步纯化。

凝胶过滤色谱法：分离效率高，可同时去除盐和小分子杂质，但需要专业设备。

生物活性验证：

点击化学效率：用DBCO-PEG-TCO与叠氮化物-荧光探针和四嗪-药物分别反应，通过荧光强度或药物活性确认双重标记效率（均应≥80%）。

稳定性测试：在PBS中孵育24小时后，检测DBCO-PEG-TCO的降解率（应＜10%），确认其稳定性。

储存条件：

短期：4℃避光保存（数周），需充氮气防止氧化。

长期：-20℃冻干保存（数月），使用前用PBS或生理盐水复溶。

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