产品名称:Tetranzine-PEG-COOH,四嗪-聚乙二醇-羧酸的反应条件优化
操作注意事项
反应条件优化:
pH控制:NHS酯反应需在pH 7-9进行,避免氨基质子化导致反应效率降低。
温度与时间:室温反应4-6小时(Tetrazine偶联)和2-4小时(COOH活化)通常足够,延长反应时间可能增加副产物(如Tetrazine分解)生成。
避光操作:Tetrazine对光敏感,需在暗处进行反应和纯化。
纯化策略选择:
透析法:简单易行,但耗时较长,适合初步纯化。
凝胶过滤色谱法:分离效率高,可同时去除盐和小分子杂质,但需要专业设备。
生物活性验证:
点击化学效率:用Tetrazine-PEG-COOH与TCO-荧光探针反应,通过荧光强度确认标记效率(≥80%)。
稳定性测试:在PBS中孵育24小时后,检测Tetrazine-PEG-COOH的降解率(应<10%),确认其稳定性。
储存条件:
短期:4℃避光保存(数周),需充氮气防止氧化。
长期:-20℃冻干保存(数月),使用前用PBS或生理盐水复溶。
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