产品名称：BCN-PEG-Biotin的反应原理

合成方法

1. 反应原理

通过 逐步偶联 将 BCN、PEG 和生物素连接，核心步骤包括：

BCN 与 PEG 的偶联：通过羧基-胺反应或点击化学（如叠氮-炔烃环加成）连接。

PEG 与生物素的偶联：通过生物素的羧基与 PEG 末端的氨基反应（如 NHS 酯活化）。

2. 实验步骤（示例）

步骤1：合成 BCN-PEG-COOH（羧酸修饰的 PEG）

BCN 的修饰：

将 BCN 与 琥珀酸酐 或 羧酸-PEG-NHS 反应，生成 BCN-COOH。

PEG 的偶联：

将 BCN-COOH 与 NH₂-PEG-COOH 在 EDC/NHS 存在下反应，生成 BCN-PEG-COOH。

步骤2：合成 BCN-PEG-Biotin

生物素的活化：

将生物素与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS） 和 二环己基碳二亚胺（DCC） 反应，生成 Biotin-NHS 酯。

偶联反应：

将 BCN-PEG-COOH 与 Biotin-NHS 酯 在 三乙胺（TEA） 存在下反应，生成 BCN-PEG-Biotin。

纯化：

通过 HPLC 或 透析 去除未反应的原料和副产物。

3. 质量控制

质谱（MS）：验证分子量（理论值 ≈ 537 Da（BCN-PEG4-Biotin）或 1,553 Da（BCN-PEG24-Biotin），具体取决于 PEG 长度）。

核磁共振（NMR）：确认 BCN 的环结构、PEG 链的完整性及生物素的连接。

HPLC：分析纯度（通常要求 ≥95%）。

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