文献：甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺丁酸酯 (mPEG-SBA) 合成及与 EPO β 结合过程中的分析色谱方法

链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1570023223000892

作者：塞米拉 ·凯里，玛丽亚姆 ·基亚尼，侯赛因 扎西 ，马吉德 ·沙巴齐，侯赛因 ·阿米尼 · b

节选：

研究了β-依泊汀(EPO) 与甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺丁酸酯 (mPEG-SBA)的偶联反应。以 mPEG 为原料合成 mPEG-SBA 化合物，并用配备蒸发光散射检测器的反相色谱系统对所得中间体和*终产物进行分析。采用苯甲酰氯标记PEG中的羟基、苄胺标记琥珀酰亚胺的方法对不同的 PEG 进行分离和表征。将合成的 mPEG-SBA 用于 EPO 的 PEG 化。采用尺寸排阻色谱法监测反应，同时测定 PEG 化、未反应的 EPO 和蛋白质聚集体。在硼酸盐缓冲液（0.1 M，pH 7.8）和 PEG/蛋白质摩尔比为 3:1 的条件下，单 PEG 化 EPO 的产量*高，而多 PEG 化 EPO 变体的产量*低。尽管EPO被认为是一种稳定的糖蛋白激素，在冷藏条件下仍保持单体状态，但用mPEG-SBA对EPO进行PEG化会导致大量EPO二聚体的形成。EPO二聚体和聚PEG化EPO的形成具有pH依赖性，在较低的pH值下，聚集体的数量较高，而聚PEG化形式的数量较低。因此，聚集的EPO应被视为主要的PEG化相关杂质。总之，本研究强调了采用合适的分析方法控制mPEG-SBA的合成及其与EPO的结合的重要性。

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