FITC-LPS

FITC标记脂多糖用于TLR4受体识别与内吞作用研究

一、产品概述

产品名称：FITC-LPS（荧光素标记脂多糖）

英文名称：FITC-labeled Lipopolysaccharide

别名：Fluorescein Isothiocyanate-LPS；荧光标记脂多糖

常见来源：大肠杆菌（E. coli O55:B5、O111:B4、O26:B6 等）

分子量：>10,000 Da（天然LPS为高分子杂多糖，分子量不定）

纯度：≥95%（脱蛋白）

荧光激发/发射波长：Ex 495 nm / Em 520 nm

外观：淡黄绿色至黄绿色冻干粉末或溶液

溶解性：可溶于PBS、H₂O、DMSO、缓冲液等

储存条件：-20°C避光干燥保存（推荐避光分装）

保质期：12个月（未开封）

二、产品结构与理化性质

1. LPS结构简介

脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌外膜的重要组成部分，由三部分构成：

脂A（Lipid A）：LPS的疏水部分，负责激活Toll样受体（TLR4）；

核心多糖（Core oligosaccharide）：连接脂A与O原；

O-特异性原（O-antigen）：重复单位组成的长链多糖，决定菌株的特异性。

2. FITC标记原理

FITC（Fluorescein isothiocyanate）通过异硫氰酸基（–N=C=S）与LPS中的伯胺类基团（主要来源于修饰的核心糖或微量蛋白）发生共价反应，形成稳定的硫脲结构，实现荧光标记。标记后LPS保留免疫活性和细胞识别功能，同时具备强烈绿色荧光。

3. 荧光性能

激发波长：495 nm

发射波长：520 nm

适用检测仪器：荧光显微镜、激光共聚焦、流式细胞仪、板式读数仪等。

三、合成与质量控制

1. 合成步骤简述

将高纯度LPS溶于碱性缓冲液（如碳酸氢钠缓冲液）；

将FITC溶于DMSO，缓慢加入LPS溶液中；

室温反应 2~4 小时，避光；

采用透析袋（MWCO ~3.5 kDa）或凝胶层析去除未结合的FITC；

冷冻干燥，终得粉末状FITC-LPS。

2. 质控指标

FITC结合度：一般为0.5–2 mol FITC/mol LPS；

荧光强度：确保高信噪比；

LPS活性检测：保留对TLR4的激活能力（可通过细胞实验或HEK-Blue™ hTLR4系统检测）；

无蛋白残留：采用蛋白酶和凝胶色谱去除污染。

四、应用方向

1. 免疫学研究

FITC-LPS常被用于研究LPS介导的免疫应答，如：

TLR4介导的先天免疫激活；

单核细胞、巨噬细胞的识别与激活；

炎症因子（如IL-6、TNF-α）释放研究；

细胞因子表达分析；

体内外炎症模型构建。

2. 细胞摄取与定位

通过FITC标记，可追踪LPS的摄取、胞内运输与分布：

巨噬细胞摄取动力学研究；

内吞通路与胞内运输分析（如与溶酶体共定位）；

LPS与膜蛋白/受体的结合行为观察；

可与DAPI、LysoTracker等染料共染成像。

3. 流式细胞术分析

FITC-LPS可用于：

分析LPS与细胞表面或胞内受体结合情况；

测定不同细胞类型对LPS的响应程度；

鉴别高摄取亚群；

研究LPS竞争性抑制或中和体活性。

4. 纳米递送系统的模型分子

由于LPS分子大、复杂且结构稳定，FITC-LPS常用于：

荧光示踪LPS包裹或共价修饰的纳米颗粒；

构建LPS仿生膜模型；

研究LPS在递送系统中释放机制与靶向能力。

五、使用方法与建议

1. 溶解方法

推荐缓慢加入无菌PBS缓冲液（pH 7.4）中，轻微涡旋；

可用37°C水浴短暂加热以助溶；

避免剧烈震荡，防止分子解聚。

2. 工作浓度建议

实验类型 推荐浓度

免疫刺激（细胞） 10–100 ng/mL

成像实验 1–10 μg/mL

流式细胞术 0.1–5 μg/mL

3. 保存与分装

建议溶液分装储存在-20°C，避光；

避免反复冻融，使用低吸附EP管；

粉末状态可保存12个月，溶液建议1个月内用完。

六、注意事项

FITC对光敏感，操作过程中需避免强光照射；

部分细胞系对LPS特别敏感，需预实验确定浓度；

不同菌株来源的LPS免疫原性不同，选择应根据实验需求；

如用于动物实验，请注意其致热性和炎症反应强度；

FITC可能干扰LPS结构或功能，务必验证其生物活性是否保留。

七、包装信息

包装规格 货号示例 储存温度 形态

100 μg FITC-LPS-100 -20°C 冻干粉

500 μg FITC-LPS-500 -20°C 冻干粉

1 mg FITC-LPS-1MG -20°C 冻干粉或水溶液

定制规格 可定制菌株/浓度 -20°C 客户指定

可根据客户需求提供不同菌株来源（E. coli O55:B5, O111:B4 等）或不同FITC标记密度的产品。

八、相关产品推荐

FITC-LTA（脂磷壁酸）：用于革兰阳性菌成分标记；

Cy5-LPS / TRITC-LPS：用于多通道成像；

FITC-Dextran：用于细胞通透性和内吞实验；

TLR4拮剂（如TAK-242）：配合使用用于信号通路研究。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务，覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料，满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制，灵活设计标记方案，快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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