BSA-FITC
FITC修饰BSA用于血浆蛋白行为模拟与纳米系统评估
一、产品概述
项目 内容
中文名称 荧光素标记牛血清白蛋白
英文名称 BSA-FITC(Fluorescein Isothiocyanate-labeled Bovine Serum Albumin)
别名 FITC-BSA、FITC-Albumin
分子量 约66,000 Da(BSA本体)
激发波长(Ex) 495 nm
发射波长(Em) 520 nm
荧光基团 FITC(Fluorescein Isothiocyanate)
形态 冻干粉末或溶液,淡黄色至黄绿色
纯度 ≥98%(SDS-PAGE,HPLC)
标记度 3–12 mol FITC/mol BSA(可定制)
储存条件 -20℃干燥避光
有效期 12个月(未开封)
二、产品背景与合成原理
1. 牛血清白蛋白(BSA)
BSA 是一种稳定性高的单体蛋白质,来源于牛血清,广泛用于生物化学、分子生物学、免疫学实验中,作为:
标准蛋白(定量);
稳定剂、封闭剂;
蛋白递送载体;
药物或纳米材料负载平台。
BSA具有多个可标记的氨基(赖氨酸残基)和疏水结构域,适合修饰与偶联。
2. FITC标记机制
FITC(荧光素异硫氰酸酯)分子中的异硫氰酸基团(–N=C=S)可与BSA分子上的伯胺基(主要是赖氨酸侧链)反应,形成稳定的 硫脲键,从而实现荧光标记。
通过调节反应条件(如FITC比例、反应时间、pH值),可控制标记密度,通常维持在 3–8个FITC/BSA 之间,以平衡荧光强度和生物活性。
三、理化性质与质控参数
项目 指标
外观 淡黄至黄绿色粉末或液体
溶解性 水、PBS、细胞培养液、Tris缓冲液等
蛋白浓度测定 采用BCA或紫外法(A280)
荧光特性 稳定发绿色荧光,Ex/Em:495/520 nm
标记率检测 比值A495/A280 或 HPLC色谱图分析
蛋白完整性 SDS-PAGE显示单一条带,无降解
无菌性 可通过0.22 μm过滤使用
内毒素 可提供低内毒素版本(<0.1 EU/mg)
四、应用领域
1. 细胞摄取与吞噬实验
BSA-FITC 常用于检测细胞(特别是巨噬细胞、肿瘤细胞、树突状细胞)对蛋白质的摄取能力:
内吞机制(胞饮、胞吞)分析;
吞噬功能活性测定;
比较不同处理对吞噬作用的影响;
与LysoTracker等染料共染观察胞内定位。
2. 血管通透性研究
由于BSA分子大小接近于血浆蛋白,BSA-FITC 常用于:
动物模型中血管渗透性测定;
肿瘤血管外渗研究;
肺水肿、脑血管屏障通透性实验;
荧光显微镜下观察蛋白渗透行为。
3. 纳米粒/药物载体构建
BSA可作为蛋白载体或模板,用于:
构建BSA纳米粒(如BSA-FITC-NPs);
表征纳米粒释放行为与靶向性;
BSA作为功能化壳层验证其细胞靶向结合能力。
4. 蛋白扩散、组织动力学研究
比较不同组织对蛋白渗透、吸收、残留的能力;
验证水凝胶、支架材料的可控释放能力;
荧光示踪在活体或离体条件下的蛋白扩散行为。
5. 封闭与染料兼容实验验证
在多色免疫荧光实验中,BSA-FITC可用于测试染料通道干扰或封闭剂质量,作为阳性或背景对照。
五、使用说明
1. 溶解方法
将BSA-FITC冻干粉缓慢溶于无菌PBS或去离子水;
建议浓度:1–10 mg/mL;
配制完成后可分装避光,4℃保存1周内使用。
2. 实验推荐浓度(按使用场景)
应用 浓度范围
细胞内吞 10–100 μg/mL
动物注射 1–10 mg/mL
纳米粒制备 0.1–2 mg/mL
荧光成像 10–100 μg/mL
渗透性研究 1–5 mg/mL
六、注意事项
避光操作:FITC易光降解,实验过程务必避光;
pH敏感性:FITC的荧光在中性偏碱环境(pH 7.4–8.0)下稳定;
反复冻融:避免多次冻融,推荐分装;
蛋白变性:避免高温和端pH处理,影响BSA功能;
染料干扰:FITC信号可能受其他绿色荧光通道干扰,需注意通道选择。
七、包装信息与订购规格
规格 货号(示例) 储存 推荐用途
1 mg BSA-FITC-1MG -20℃避光 流式、成像
5 mg BSA-FITC-5MG -20℃避光 多次细胞实验
10 mg BSA-FITC-10MG -20℃避光 动物模型使用
100 mg 定制 -20℃避光 大量载体制备
低内毒素版本 可选 -20℃避光 动物或免疫实验
八、相关产品推荐
BSA-Texas Red / BSA-Cy5:红色/远红荧光蛋白标记;
FITC-Dextran:用于细胞渗透性与血管通透实验;
Albumin-Cy7:适用于体内近红外成像;
FITC-OVA:原加工研究;
未标记BSA:封闭剂/对照组使用。
九、总结
BSA-FITC 是一种经典且广泛应用的蛋白荧光探针,结合了 BSA 的稳定性和 FITC 的荧光性能,可在细胞摄取、血管渗透、药物递送、组织动力学等多个研究方向中实现蛋白分子的可视化与定量分析。使用时应注意其光敏性与pH依赖性,选用合适的标记度和浓度将有助于获得高质量实验数据。
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厂家:西安齐岳生物科技有限公司
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!
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