FITC-NHS

荧光素NHS酯（FITC-NHS）用于蛋白质、体共价标记

一、基本信息概览

项目 内容

中文名称 荧光素NHS酯，FITC-NHS

英文名称 NHS-Fluorescein 或 Fluorescein-NHS Ester

别名 荧光素-N-羟基琥珀酰亚胺酯、NHS-Fluorescein Ester

分子式 C23H15NO9

分子量 449.37 g/mol

CAS号 105022-66-6（或常见商品混合物）

激发波长（Ex） 494–495 nm

发射波长（Em） 517–520 nm

纯度 ≥95%（HPLC）

形式 橙黄色或淡黄色粉末

溶解性 易溶于DMSO、DMF、无水乙醇、无水DMSO

储存条件 -20°C，避光、干燥、密封保存

包装规格 常见1 mg、5 mg、10 mg、25 mg 或按需定制

二、产品结构与反应原理

1. FITC-NHS结构说明

FITC-NHS是通过在荧光素结构上引入 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS酯） 基团而制成的活性荧光染料。该基团对伯胺具有高亲和性，使其成为蛋白质、肽类、小分子等胺基标记的首选荧光试剂。

2. 反应原理

FITC-NHS 主要通过 NHS酯与伯胺基（–NH₂） 的亲核反应，在温和条件下形成稳定的 酰胺键（–CONH–）。反应条件通常为：

pH 7.2–8.5 的缓冲液（如PBS、碳酸盐缓冲液）；

反应温度：室温或4°C；

反应时间：15分钟–2小时不等；

避光操作。

三、优势特点

✅ 高活性：NHS酯反应效率高，快速与伯胺反应；

✅ 荧光稳定：FITC荧光强、在生物样品中易检测；

✅ 通用性广：可标记蛋白、体、多肽、纳米材料等；

✅ 可调节性：通过控制摩尔比调节标记密度；

✅ 生物兼容：适合细胞标记、分子成像、免疫实验等；

✅ 储存方便：冻干粉末稳定性好，保存周期长。

四、技术指标与质控信息

项目 指标

纯度（HPLC） ≥95%

水分含量 <1.5%（卡尔费休法）

荧光强度 Ex 495 nm / Em 520 nm，高亮绿色

活性保留率 ≥90%（6个月内）

反应选择性 专一性强，仅标记伯胺基团

背景荧光 低

溶解性 DMSO、DMF中优溶，不溶于水

稳定性 避光冷藏稳定12个月以上

不含缓冲盐或杂质 高纯度制剂

五、典型应用方向

1. 蛋白质与体标记

FITC-NHS 是标记体、酶、血清白蛋白（如FITC-BSA、FITC-IgG）等蛋白质的标准试剂。其标记流程包括：

调整蛋白至pH 8.3缓冲体系；

加入FITC-NHS（溶于DMSO）；

温和反应30–60分钟；

通过透析、凝胶过滤（如Sephadex G-25）去除游离染料；

储存于PBS中，4°C避光保存。

2. 小分子和药物标记

用于标记含有伯胺基的小分子，例如：

药物化合物；

多肽链（如GRGDY-NH₂）；

药物靶向探针；

细胞渗透肽（如TAT、Penetratin）；

便于后续细胞摄取、定位、荧光定量等研究。

3. 纳米材料功能化

FITC-NHS 可用于：

纳米粒（如SiO₂、PLGA、AuNPs）的表面标记；

与聚乙烯亚胺（PEI）、壳聚糖、BSA等表面胺基偶联；

构建荧光追踪型药物递送系统；

荧光检测、细胞靶向及体内分布可视化。

4. 细胞标记与成像

FITC-NHS 通过与细胞膜或胞内蛋白反应，实现活细胞或固定细胞的标记；

可用于荧光显微镜、流式细胞仪分析；

特别适用于非透膜染料标签的构建（如胺标记脂质体）；

某些实验中可用于单细胞标记或荧光识别。

5. 免疫分析与生物芯片

在ELISA、Western blot、蛋白质芯片中，FITC-NHS标记后的体或原可用于：

荧光检测系统（替代HRP）；

多重标记、通道分辨；

荧光信号增强或荧光共聚焦检测。

六、使用说明与实验建议

1. 溶解建议

推荐使用无水DMSO或DMF溶解；

常规浓度：1–10 mg/mL；

一次性使用量根据目标物分子量及摩尔比计算；

溶液可临时使用，避免长时间存放（活性易水解）；

建议现配现用，避免暴露在潮湿空气中。

2. 标记流程（以蛋白质为例）

示例操作：

取蛋白质（如IgG）溶于0.1 M NaHCO₃（pH 8.3）缓冲液；

加入FITC-NHS（以1:5～1:20的摩尔比）；

室温避光反应30–60分钟；

通过透析或凝胶柱去除未反应的FITC；

用PBS重溶，测定A495与A280判断标记度。

标记度计算公式：

标记度（FITC/BSA） = (A495 × 3.1) / (A280 - (0.31 × A495))

3. 注意事项

⚠ 避光操作：FITC易光降解，操作过程中尽量避光；

⚠ pH控制：过酸或过碱会影响NHS酯反应效率与染料稳定性；

⚠ 水敏感性：FITC-NHS与水反应迅速，应避免与水直接接触；

⚠ 反应时间控制：反应过久可能导致非特异性标记或蛋白失活；

⚠ 除杂工艺：必须彻底去除游离FITC，避免背景荧光干扰。

七、包装与订购信息

规格 包装形式 用途建议

1 mg 小瓶冻干粉末 实验起步、方法优化

5 mg 冻干粉末 多次蛋白标记

10 mg 冻干粉末 纳米粒或多批次实验

25 mg+ 定制规格 药物开发、项目需求

可根据需求提供 高纯度版、低水分版、低内毒素版，并支持定制冻干溶液形式。

八、相关产品推荐

产品名称 应用

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九、总结

FITC-NHS 是一种活性高的荧光标记试剂，因其反应条件温和、专一性强、信号明亮且易于追踪，被广泛应用于蛋白标记、细胞成像、纳米药物开发、生物芯片和免疫检测等多个领域。通过规范的操作与优化的标记参数，能够高效、稳定地将荧光基团引入目标分子，为生物分析与可视化提供强有力工具。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务，覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料，满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制，灵活设计标记方案，快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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