产品名称:DBCO修饰葡聚糖,Dextran4-DBCO的合成方法
合成方法
方法1:羧基活化法(适用于羧化葡聚糖)
羧化葡聚糖制备:
将葡聚糖溶于磷酸盐缓冲液(PBS),加入高碘酸钠(NaIO₄)氧化邻位羟基生成醛基,再与氨基乙酸(Glycine)反应引入羧基。
或直接购买预羧化的葡聚糖(如Dextran-COOH)。
DBCO偶联:
将羧化葡聚糖溶于MES缓冲液(pH 5.5),加入EDC和NHS活化羧基(30分钟)。
加入DBCO-NH₂(过量),室温反应2-4小时。
透析(MWCO 3.5 kDa)去除未反应试剂,冻干得Dextran4-DBCO。
方法2:羟基直接反应法(CNBr活化)
葡聚糖活化:
将葡聚糖溶于二甲基亚砜(DMSO),加入CNBr(1:1摩尔比),室温反应30分钟生成氰酸酯中间体。
快速加入DBCO-胺(过量),继续反应2小时。
透析(MWCO 3.5 kDa)纯化,冻干得产物。
表征方法
NMR:检测DBCO特征峰(如芳香质子信号)确认修饰成功。
FTIR:观察酰胺键(1650 cm⁻¹)或酯键(1740 cm⁻¹)的吸收峰。
荧光胺法:定量测定剩余游离氨基,计算DBCO修饰度。
GPC:分析分子量分布,确认无交联或降解。
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