DBCO-NHS酯（全称：Dibenzocyclooctyne-N-hydroxysuccinimide ester），是一种功能性活性酯试剂，广泛应用于生物正交化学中的生物分子标记和偶联反应。

其结构由二苯并环辛炔（DBCO）基团与N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS酯）通过酯键连接而成。DBCO是一种环状烯炔结构，具备独特的应力诱导环张开能力，能够在生理条件下与叠氮基（azide）化合物发生快速且高效的铜自由“点击”反应（Strain-Promoted Azide-Alkyne Cycloaddition, SPAAC），而NHS酯部分则具有优良的活性，可与含有初级胺基的生物分子（如蛋白质、抗体、肽链或氨基修饰的核酸）形成稳定的酰胺键。

主要特点与优势

1. 铜自由点击反应：DBCO-NHS Ester所含的DBCO结构能在无催化剂（尤其是铜离子）的条件下与叠氮基发生高效反应，避免了铜催化“点击”反应中可能存在的细胞毒性和副反应，适合细胞和体内生物标记应用。

2. 高反应特异性与效率：SPAAC反应速度快，反应条件温和，产率高，且副产物少，保证标记和偶联的高选择性和高纯度。

3. 多功能性偶联位点：NHS酯结构可快速且高效地与蛋白质或其他含胺基分子发生酰胺化反应，实现DBCO基团的稳定接枝，为后续的生物正交反应提供结合位点。

4. 良好的水溶性和稳定性：DBCO-NHS Ester在有机溶剂和缓冲液中稳定，便于储存和使用，适合多种生物实验体系。

应用领域

• 蛋白质和抗体的标记与修饰：通过NHS酯与蛋白质赖氨酸残基的氨基结合，将DBCO功能基团引入蛋白质，使其具备与叠氮基标记分子快速反应的能力，实现蛋白质的荧光标记、药物偶联或功能化改造。

• 核酸及寡核苷酸修饰：DBCO-NHS可用于修饰含氨基修饰的寡核苷酸链，实现与叠氮基功能分子的高效偶联，用于探针制备和靶向输送。

• 生物大分子间的交联和构建纳米材料：利用SPAAC技术构建蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸等复合物，或用于生物材料的功能化改造。

• 细胞和体内标记：DBCO基团能够在细胞内无毒条件下与叠氮标记物进行快速结合，广泛用于细胞成像、药物递送系统的构建及生物诊断等领域。

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