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Ovalbumin-FITC,FITC修饰卵清蛋白用于免疫活性分析与原传递示踪
发布时间:2025-07-18     作者:ssl   分享到:

Ovalbumin-FITC

FITC修饰卵清蛋白用于免疫活性分析与原传递示踪

一、产品概述

中文名称:FITC标记卵白蛋白

英文名称:Ovalbumin-FITC

别名:FITC-Ova、荧光素标记OVA

分子量:约45 kDa(天然卵白蛋白)

FITC标记度:通常在3~10 FITC分子/OVA分子之间,可定制

荧光激发/发射波长:495 nm / 519 nm(FITC特性)

外观:黄色至绿色冻干粉末或溶液

纯度:≥95%(SDS-PAGE)

溶解性:可溶于水、PBS、Tris缓冲液

储存条件:-20°C 避光,避免反复冻融

用途级别:科研专用,不用于临床诊断或治疗

二、卵白蛋白与FITC标记原理

1. 卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)

卵白蛋白是从鸡蛋蛋白中提取的一种单链糖蛋白,是研究中常用的原模型蛋白,具有良好的免疫原性和生物活性。在免疫学研究、原递呈实验、树突状细胞功能研究、T细胞激活机制中被广泛应用。

2. FITC(Fluorescein Isothiocyanate)

FITC是一种绿色荧光染料,带有反应性异硫氰酸酯(–N=C=S)基团,可与蛋白质中的赖氨酸残基上的氨基形成稳定的硫脲键,实现共价荧光标记。

3. Ovalbumin-FITC 的制备原理

在碱性缓冲条件(pH 8.5~9.0)下,将FITC与OVA反应;

反应后通过透析或凝胶过滤去除游离FITC;

纯化后冻干或浓缩储存。

三、理化性质

项目 参数

分子量 ~45 kDa(天然OVA)

荧光染料 FITC(Fluorescein)

激发峰 495 nm

发射峰 519 nm

溶解度 高度可溶于水性缓冲液

稳定性 冷冻避光条件下稳定12个月

四、应用方向

1. 原摄取与处理实验

Ovalbumin 是研究树突状细胞、巨噬细胞、B细胞等 APC(原递呈细胞) 对原的内吞、加工与递呈机制的重要模型;

FITC标记可实现原的可视化追踪和定量分析;

结合流式细胞术或荧光显微镜评估APC对原的摄取能力。

2. 免疫学研究

Ovalbumin-FITC 作为经典 MHC I/II 路径原,广泛用于研究T细胞激活、交叉递呈(Cross-presentation);

可用于建立OVA模型小鼠(如 OT-I、OT-II 小鼠)中CD4⁺/CD8⁺ T细胞激活实验;

用于疫苗开发与递送系统效率验证。

3. 细胞内吞与转运机制

FITC-Ova进入细胞后可用于观察其在内体、溶酶体中的定位与分布;

可结合LysoTracker等染料进行共定位实验;

评估胞吞活性和原释放路径。

4. 纳米颗粒/药物载体研究

将FITC-Ova负载于纳米粒、脂质体、凝胶等载体中,研究其靶向性释放与细胞摄取;

适用于药物递送系统可视化、定量释放与胞内转运研究。

5. 流式细胞术与成像分析

流式细胞仪(FACS)用于检测原摄取效率;

共聚焦或激光扫描显微镜用于实时可视化分析;

结合DAPI、Cy5等染料进行多通道染色。

Ovalbumin-FITC,FITC修饰卵清蛋白

五、实验操作建议

1. 溶解方法

建议使用无菌PBS或纯水溶解至所需浓度;

溶液中可加入0.02% NaN₃作防腐剂(如长期使用);

溶解后应分装避光保存,避免反复冻融。

2. 推荐使用浓度

应用 建议浓度

细胞摄取实验 10–100 μg/mL

流式分析 1–10 μg/mL

小鼠注射(免疫) 10–100 μg/只

纳米载体负载实验 可根据载体比调整

六、产品规格与定制服务

包装规格 编号示例 备注

1 mg OVA-FITC-1 小规模实验

5 mg OVA-FITC-5 多次重复实验

10 mg OVA-FITC-10 大样本使用

定制服务 可调标记度、冻干粉或液体、无菌无内毒素版本

支持以下定制:

高标记度(>10 FITC/OVA);

与Cy5、Rhodamine、AF488等荧光染料替换;

降低自发荧光背景版本;

与纳米粒/胶束共修饰服务。

七、质控标准(QC)

检测项目 方法 标准

纯度 SDS-PAGE、UV ≥95%

FITC标记度 UV法(495/280 nm) 3–10 mol FITC/mol OVA

自由FITC含量 HPLC 不可检出或微量

溶解度 观察 完全溶于PBS

荧光稳定性 光照试验 ≥90%保留率(7天)

八、储存与有效期

状态 储存条件 有效期

冻干粉末 -20°C 避光 12个月

水溶液 4°C 避光,避免污染 建议7天内使用

冷冻分装 -80°C可长期保存 ≥12个月

注意事项:

FITC容易光漂白,请避光操作;

避免反复冻融,建议分装使用;

开瓶后尽量在2周内使用完毕。

九、常见问题(FAQ)

Q1:Ovalbumin-FITC 是否适用于体内成像?

A:FITC在体内成像穿透性有限(主要限于浅层组织或透明结构),如需深层成像,建议使用近红外染料(如Cy7标记OVA)。

Q2:是否适用于CD4⁺/CD8⁺ T细胞激活实验?

A:是,OVA-FITC 可用于加载到DC细胞,激活来自OT-I/OT-II小鼠的T细胞(分别识别OVA257-264和OVA323-339)。

Q3:能否用于疫苗递送载体的示踪?

A:完全可以,FITC-Ova广泛用于构建可视化疫苗递送系统和原释放实验。

十、总结

Ovalbumin-FITC 是一款经典的免疫学研究工具蛋白,结合卵白蛋白的原性和FITC的可视化特性,成为研究原摄取、细胞内转运、T细胞激活以及纳米载体递送等方向的理想工具。

产品经过严格纯化、标记度控制与质控检测,适配多种实验平台,如流式细胞术、共聚焦显微成像、细胞实验与小鼠动物模型。可根据不同实验需求定制不同染料、标记度或载体组合。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务,覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料,满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制,灵活设计标记方案,快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!

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