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FITC-Human fibrinogen,FITC标记人纤维蛋白原用于血栓形成与凝血机制研究
发布时间:2025-07-18     作者:ssl   分享到:

FITC-Human  fibrinogen

FITC标记人纤维蛋白原用于血栓形成与凝血机制研究

一、产品基本信息

中文名称:FITC标记人纤维蛋白原

英文名称:FITC-Human Fibrinogen

别名:FITC-Fibrinogen、荧光标记纤维蛋白原

分子式:蛋白质,不适用

分子量:约340 kDa(天然三链结构)

FITC标记度:常见标记度为 2–10 mol FITC/mol 蛋白分子,可定制

激发/发射波长:Ex 495 nm / Em 519 nm

外观:浅黄色至绿色冻干粉末或溶液

纯度:≥95%(SDS-PAGE)

级别:科研专用级

储存条件:-20°C 避光干燥

溶解性:易溶于PBS或Tris缓冲液

二、产品背景与结构简介

1. 人纤维蛋白原(Human Fibrinogen)

纤维蛋白原是一种高分子量的血浆糖蛋白,由三条多肽链(Aα、Bβ和γ)构成,两组对称结构组合形成分子总量约340 kDa。它是血液凝固过程中关键的前体蛋白之一,能在凝血酶(Thrombin)作用下转化为纤维蛋白(Fibrin),形成血栓网状结构,封闭创伤面。

在细胞生物学、血液学、伤口修复、血管生成、血栓形成等研究领域中,纤维蛋白原具有广泛应用价值。

2. FITC标记原理

FITC(异硫氰酸荧光素)带有异硫氰酸基团(–N=C=S),可与蛋白质分子上的游离氨基(通常为赖氨酸侧链)共价结合,形成稳定的硫脲键,从而使蛋白质具有绿色荧光,可用于可视化检测。

三、制备与质量控制

1. 合成方法简述:

纤维蛋白原溶于碱性缓冲液(如0.1 M碳酸氢钠缓冲液,pH 8.3);

缓慢滴加DMSO中预先溶解的FITC,常温避光反应2–4小时;

使用Sephadex G-25柱或透析袋去除未反应的游离FITC;

对产物进行浓缩、冻干,终得到FITC标记的人纤维蛋白原。

2. 质控项目:

检测项目 方法 合格标准

蛋白纯度 SDS-PAGE ≥95%

标记度 495/280比率法 2~10 mol FITC/mol 蛋白

游离FITC含量 HPLC 不可检出或<5%

生物活性 凝胶实验 保持部分凝胶功能活性

溶解性 实验检测 可溶于PBS(1–10 mg/mL)

FITC-Human  fibrinogen,FITC标记人纤维蛋白

四、产品应用方向

1. 细胞粘附与识别研究

FITC-Fibrinogen 被广泛用于研究血小板、巨噬细胞、肿瘤细胞等对纤维蛋白原的粘附能力;

适用于检测细胞表面整合素受体(如 αIIbβ3, αvβ3);

可用于观察细胞识别粘附机制、免疫突触形成与细胞化。

2. 血栓形成与凝研究

FITC-Fibrinogen可用于荧光显微镜或共聚焦成像追踪凝血过程;

观察血小板介导的血栓形成、纤维网生成过程;

用于血管模型中再生/再内皮化过程可视化研究。

3. 生物材料与支架功能评价

荧光标记后便于研究人工血管、创伤敷料、纳米纤维支架对纤维蛋白原的吸附、释放与降解行为;

评估生物医用材料对血液相容性与止血性能的影响。

4. 肿瘤微环境中的纤维网络研究

肿瘤组织中纤维蛋白原的沉积与迁移能力影响肿瘤细胞侵袭;

FITC标记后有助于成像分析其在肿瘤中的分布和降解;

可结合基质金属蛋白酶(MMP)活性检测。

5. 流式细胞术与激光共聚焦

利用FITC发射特性可与流式细胞仪配合检测细胞表面受体与FITC-Fibrinogen结合程度;

激光共聚焦成像可定位观察细胞表面聚集、融合、迁移等动态行为。

五、使用方法与操作建议

1. 溶解方式

使用无菌PBS(pH 7.4)或Tris缓冲液溶解,浓度建议为 1–5 mg/mL;

如为粉末产品,溶解后建议分装储存,避免反复冻融。

2. 使用浓度建议

实验类型 建议浓度

细胞粘附实验 10–100 μg/mL

流式细胞术 1–10 μg/mL

成像类实验(共聚焦) 20–50 μg/mL

血栓模型注射实验 50–200 μg/只

六、储存条件与稳定性

状态 储存条件 有效期

冻干粉末 -20°C 干燥避光 12个月

溶液状态 4°C 避光,不含防腐剂 1–2周

溶液状态(含NaN₃) 4°C 可保存4周以上 推荐分装使用

注意事项:

避光操作,防止FITC荧光衰减;

避免与重金属离子(如Fe³⁺、Cu²⁺)共存,避免氧化损伤;

溶解液建议过滤除菌后使用。

七、常见问题解答(FAQ)

Q1:FITC-Fibrinogen 是否保留凝血活性?

A:部分保留,FITC标记可能轻微影响蛋白三维构象及其与凝血酶的作用。用于标记和细胞实验完全适用;如对活性要求较高,请选用低标记度版本或活性验证版。

Q2:可否用于动物实验?

A:本产品为科研级原料,可用于小鼠、兔等模型的荧光示踪、血栓成像等实验(需自行评估免疫源性风险)。

Q3:是否可以与其他标记物联合使用?

A:可以,FITC通道可与DAPI、Cy5、PE等荧光染料组合进行多重染色和成像,需注意激发滤光片匹配。

Q4:能否定制更高或更低标记度?

A:支持标记度定制服务,范围从1–15 FITC/蛋白分子均可提供,满足不同灵敏度或活性需求。

八、产品规格与订购信息

包装规格 编号示例 应用建议

0.5 mg FIB-FITC-0.5 初步方法开发

1 mg FIB-FITC-1 常规实验用量

5 mg FIB-FITC-5 中等规模实验

≥10 mg 定制服务 动物试验/材料涂层

九、总结

FITC-Human Fibrinogen 是一款兼具天然纤维蛋白原功能与荧光可视化能力的多功能标记蛋白。适用于细胞粘附、血栓成像、生物材料相容性评价、免疫信号分析及疾病模型机制研究等领域。

其良好的荧光强度、溶解性和稳定性,使其成为研究血液-生物界面、止血系统功能以及细胞-外基质相互作用的重要工具之一。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务,覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料,满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制,灵活设计标记方案,快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!

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