FITC-NHS 绿色荧光素标记活性酯

FITC-NHS活性酯型荧光素 | 用于蛋白、多肽及小分子胺修饰

一、产品名称及基本信息

中文名称：荧光素-NHS 酯 / 绿色荧光素标记活性酯

英文名称：Fluorescein-NHS Ester / FITC-NHS

别名：荧光素N-羟基琥珀酰亚胺酯、FITC-活性酯、荧光素NHS酯

CAS号：82927-26-4

分子式：C24H15NO9

分子量：461.38 Da

外观：橙黄色至黄绿色粉末

纯度：≥95%（HPLC）

溶解性：DMSO、DMF、无水二氯甲烷、干燥乙腈、无水PBS等

储存条件：-20°C避光、干燥密封保存

二、产品概述

FITC-NHS（Fluorescein Isothiocyanate N-hydroxysuccinimide ester）是一种绿色荧光染料的活性酯衍生物，通过将荧光素上的羧基修饰为NHS酯而制成。其能够与胺基（–NH₂）反应，形成稳定的酰胺键，是生物分子（如蛋白质、多肽、体、氨基聚合物等）标记中常用的活性染料之一。

作为一种高效、广泛应用的荧光标签，FITC-NHS 具有优异的水溶性、化学稳定性和强烈的绿色荧光发射，已广泛用于细胞成像、蛋白标记、体示踪、微球修饰、微阵列芯片检测、纳米材料构建等前沿生命科学与材料科学研究领域。

三、结构与性质

1. 荧光特性

激发波长（λEx）：494–495 nm

发射波长（λEm）：518–520 nm

荧光颜色：绿色

光稳定性：良好，但需避强光照射以防漂白

2. NHS酯反应特性

NHS（N-Hydroxysuccinimide）酯是常见的羧酸活化形式之一，在碱性条件（pH 7.5–9.0）下易于与伯胺发生反应，形成稳定的酰胺键。其反应速率快、选择性高，适用于：

蛋白质（如赖氨酸残基）

多肽N端

氨基修饰材料

胺基聚合物（如PLL、PEG-NH₂）

四、合成背景与原理

FITC-NHS 是通过荧光素与 NHS 和 DCC 或 EDC 等缩合剂作用合成。该结构一端含有荧光素母体，另一端为NHS酯基团，可与含氨基的目标分子通过亲核取代反应偶联，生成荧光标记产物，适用于定量或定性检测。

五、产品应用领域

1. 蛋白质与体标记

与IgG、牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白、酶类等蛋白分子反应

用于构建荧光体、免疫染色、Western blot、ELISA、FACS 等实验

2. 细胞与组织成像

标记表面蛋白、胞内结构、细胞膜

细胞摄取及胞内追踪研究

3. 多肽与核酸修饰

多肽合成中的荧光标签引入

适用于 N 端标记或侧链含胺残基标记

4. 纳米材料与聚合物修饰

标记含氨基的PEG、纳米粒、金属有机框架（MOF）、树枝状聚合物

构建荧光示踪的纳米药物递送系统

5. 微球与芯片标记

结合氨基修饰的微球、玻璃基底、硅片等用于生物传感器和微阵列芯片构建

六、实验操作建议

1. 溶解方法

使用干燥、无水的 DMSO 或 DMF 溶解，浓度 10–20 mM

使用前新鲜配置，避免吸潮降解

2. 偶联反应条件

缓冲液：碳酸盐缓冲液、HEPES、PBS（pH 7.5–8.5，不能含胺）

反应时间：30 min ~ 2 h

反应温度：室温或 4°C（缓慢反应可减少副反应）

摩尔比：1:1～10（胺基底物:FITC-NHS）

3. 去除未反应FITC-NHS

可用透析、凝胶过滤（如 Sephadex G-25）、HPLC等方法纯化标记产物

七、注意事项与常见问题

问题 解答

NHS酯是否稳定？ 对水敏感，遇水或潮湿空气易水解，需避光、干燥保存，建议一次性用完。

反应缓冲液是否能使用 Tris？ 否。Tris 含有一级胺，会与 FITC-NHS 竞争反应，建议使用不含胺基的缓冲液（如碳酸盐缓冲液）。

如何验证标记成功？ 可通过 UV-Vis 测定 FITC 吸收峰（495 nm），或使用 SDS-PAGE、流式细胞仪、共聚焦显微镜等方法分析。

是否可用于活细胞染色？ FITC-NHS 本身不适用于直接孵育活细胞，应先标记体或分子后清洗再应用于细胞实验。

八、储存与稳定性

保存温度：–20°C以下

避光保存：FITC对光敏感，避光操作，使用棕色瓶分装

干燥要求：必须密封干燥环境，避免水汽进入

有效期：在密封、干燥、避光状态下可稳定保存12个月

建议开封后分装成小份量，避免反复开盖吸潮。

九、包装规格与定制服务

包装规格 推荐用途

1 mg 小试筛选，偶联试验

5 mg 常规蛋白、多肽标记

10 mg 多样品标记，分子构建

50 mg / 100 mg 大量标记或商业应用

定制服务：

标记度优化、纯度调控

其他荧光染料衍生NHS酯（如 TRITC-NHS, Cy5-NHS 等）

批量合成，提供COA、MSDS、HPLC图谱、NMR等报告

十、总结

FITC-NHS 是一类高效、广泛应用的绿色荧光活性酯试剂，能高选择性地与生物分子中的胺基反应，实现可视化标记和功能分子构建。其在蛋白标记、细胞成像、纳米材料功能化等领域具有不可替代的地位。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务，覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料，满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制，灵活设计标记方案，快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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