文献：重组细胞外囊泡的生成及其作为生物参考材料的应用

链接：https://www.nature.com/articles/s41467-019-11182-0

作者：爱德华·吉里克斯乔里·图尔肯斯伯特·邓特扬·范·德恩连·利彭斯格伦·维尔高文伊丽莎·海尔曼德尔菲娜·德·萨特克里斯·吉瓦特弗朗西斯·伊彭斯伊尔卡·米纳莱宁彼得-扬·范·博克斯塔尔托马斯·德比尔马卡·HM·沃本，埃丝特·NM·诺尔特-特霍恩，卡塔日娜·布洛赫约翰内斯·V·斯温宁，埃德温·范德波尔里恩克·纽兰吉尔特·布拉姆斯尼科·卡勒瓦特彼得·梅斯特达格乔·范德松佩勒汉内洛尔·丹尼斯…安·亨德里克斯 

节选：

rEV聚乙二醇化

将rEV (2 x 10 10 ) 加入 100 µL 0.016 mg/mL DMPE-PEG 5k (PG1-DM-5K, Nanocs, NY, USA) 中，40 °C 孵育 2 小时，期间轻轻混匀。使用 DMPE-PEG-生物素构建体 (Nanocs, NY, USA) 并使用链霉亲和素包被的磁珠进行沉淀，优化了该 DMPE-PEG 5k 浓度。使用靶向 EGFP 的蛋白质印迹分析，我们发现在 0.016 mg/mL DMPE-PEG-生物素浓度下，沉淀信号*强，而流穿液信号*弱（补充图 13c）。

rEV PEGylation

rEV (2 x 1010) were incubated in 100 µL of 0.016 mg/mL DMPE-PEG 5k (PG1-DM-5K, Nanocs, NY, USA) at 40 °C for 2 h while being gently mixed. This concentration of DMPE-PEG 5 K was optimized using a DMPE-PEG-biotin construct (Nanocs, NY, USA) and precipitation using streptavidin coated magnetic beads. Using western blot analysis targeting EGFP we saw the highest signal in the precipitation and the lowest signal in the flow through at a concentration of 0.016 mg/mL DMPE-PEG-biotin (supplementary fig. 13c).

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