文献:原位膜生物素化可实现循环中小细胞外囊泡的直接标记和准确动力学分析
链接:https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.1c01176
作者:于自力赵毅范淼吴敏夏厚福陈卓坤刘海明赵以芳陈刚*
节选:
循环小细胞外囊泡 (sEVs) 是天然存在的纳米级膜囊泡,可在细胞间传递生物活性分子。传统上,为了评估其在体内的行为,必须将循环 sEVs 从血液中分离出来,然后在体外用成像材料标记,*后注射回动物血液循环中进行后续检测。繁琐的分离-标记-回输程序可能会对循环 sEVs 的自然特性产生不良影响,从而改变其行为和体内检测的动力学。在此,我们提出了一种原位生物素化策略,通过静脉注射 DSPE-PEG-生物素直接标记循环 sEVs,旨在更生物友好且准确地评估循环 sEVs 的体内动力学。这种分析策略无需分离-标记-回输程序,也不会对 sEVs 的自然行为产生不利影响。结果表明,小鼠体内普通循环sEV的寿命约为3天。此外,我们首次揭示了不同细胞来源的循环sEV亚群在体内动力学上的差异,其中红细胞来源的sEV寿命*长。此外,与原位或自体移植的循环sEV相比,同种异体移植的循环sEV寿命*短。此外,原位生物素化策略也为生物素化的循环sEV的富集提供了一种方法。总之,本研究提供了一种原位标记循环sEV的新策略,有助于准确表征其体内动力学,从而加速其作为生物标志物和诊疗载体的未来应用。
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