Concanavalin A-FITC

FITC标记刀豆球蛋白A（ConA-FITC）用于糖链识别与细胞膜糖分析

一、产品简介

Concanavalin A-FITC（ConA-FITC） 是将植物凝集素Concanavalin A（简称ConA）与荧光染料FITC（荧光素异硫氰酸酯）共价偶联制备的荧光标记蛋白。ConA是来源于刀豆（Canavalia ensiformis）的植物凝集素，具有特异性结合α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖残基的能力，广泛应用于细胞表面糖类结构的识别、细胞膜糖蛋白标记及生物大分子分析。通过FITC标记后，ConA能在荧光显微镜、流式细胞仪等平台上实现高灵敏度的荧光检测，助力糖蛋白定位、细胞表面糖链研究及细胞活性分析。

二、Concanavalin A（ConA）简介

来源：从刀豆种子提取得到的四聚体蛋白凝集素；

分子量：约26 kDa（单体），四聚体约104 kDa；

糖结合特异性：特异结合α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖的糖基结构；

生物学功能：

介导细胞间聚集；

识别和结合细胞表面糖蛋白和糖脂；

诱导T细胞激活，作为免疫刺激剂。

三、FITC的标记原理

FITC含有活性的异硫氰酸酯基团（–N=C=S），能与ConA蛋白上的赖氨酸残基氨基（–NH₂）发生共价键合；

反应条件温和，确保ConA的糖结合活性及结构稳定性；

标记后经纯化去除游离FITC，获得高纯度的ConA-FITC。

四、产品理化性质

性质 说明

外观 绿色至黄绿色透明液体或冻干粉末

分子量 四聚体约104 kDa

荧光特性 激发波长约495 nm，发射波长约520 nm（绿色荧光）

溶解性 良好溶于PBS或生理缓冲液

稳定性 常温稳定，避光保存更佳

标记度（FITC/ConA） 通常1–4 FITC分子/ConA四聚体

五、产品性能特点

1. 高特异性结合

ConA-FITC保持了ConA对α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖残基的高度特异性，能够选择性识别细胞表面及糖蛋白上的糖链结构。

2. 强烈稳定的绿色荧光

FITC标记使得ConA具备强烈的绿色荧光信号，便于通过荧光显微镜、流式细胞仪等多种检测平台进行灵敏检测。

3. 保持蛋白活性

标记过程温和，大程度保持了ConA的糖结合能力和蛋白质构象稳定。

4. 适用性广泛

不仅适用于细胞膜糖蛋白的标记和定位，也适合于生物大分子糖链结构分析及免疫学研究。

六、主要应用领域

1. 细胞表面糖蛋白标记和成像

利用ConA-FITC标记细胞表面α-D-葡萄糖/甘露糖残基，分析细胞表面糖基化状态；

结合荧光显微镜观察细胞膜糖蛋白分布及动态变化；

应用于肿瘤细胞、免疫细胞及多种细胞类型的表面糖类研究。

2. 流式细胞术

结合流式细胞仪定量检测细胞表面糖蛋白表达水平；

分析细胞群体中糖链分布的异质性。

3. 组织切片免疫荧光

作为糖类特异性探针用于组织样本中糖蛋白定位；

结合其他免疫标记，实现多重染色。

4. 生物大分子糖链分析

研究糖蛋白、糖脂分子中的糖基组成和结构；

用于糖链变化在疾病发展中的机制研究。

5. 免疫学及细胞激活研究

研究ConA诱导的T细胞活化过程；

结合荧光信号监测细胞活性变化。

七、实验使用建议

1. 配制与储存

溶解：ConA-FITC冻干粉可用PBS缓冲液（pH7.4）复溶，浓度根据实验需要一般为0.1–1 mg/mL；

储存：冻干粉-20°C避光保存，复溶液4°C避光短期保存，避免反复冻融。

2. 使用注意事项

避免强光照射，减少荧光漂白；

浓度和孵育时间根据实验类型优化，常用孵育时间为30分钟至1小时；

使用前可用适当缓冲液稀释，保证蛋白稳定性。

3. 免疫荧光染色

细胞或组织固定后，用ConA-FITC染色，温和孵育；

洗涤去除未结合分子，进行荧光成像。

八、质量控制指标

项目 标准指标

外观 绿色荧光冻干粉或透明液体

纯度 ≥95%

荧光性质 激发495 nm，发射520 nm，信号强烈稳定

糖结合活性 保持≥90%原ConA糖结合能力

分子量 SDS-PAGE确认四聚体结构完整

溶解性 良好，复溶后无沉淀

九、包装规格

规格 包装形式 储存条件

0.5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

1 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

十、常见问题解答

Q1：ConA-FITC的激发和发射波长是多少？

A：激发波长约495 nm，发射波长约520 nm，呈鲜艳绿色荧光。

Q2：使用ConA-FITC标记细胞时需要注意什么？

A：建议控制染色浓度和时间，避免非特异性结合及荧光淬灭，染色后需充分洗涤。

Q3：是否可以用于活细胞染色？

A：ConA-FITC可用于活细胞表面糖蛋白的标记，但应注意浓度和孵育时间以保证细胞活力。

十一、总结

Concanavalin A-FITC作为一款经典的荧光标记植物凝集素，凭借其高特异性糖结合能力和优异的荧光性能，广泛应用于细胞表面糖蛋白的识别与成像、免疫学研究及生物大分子糖链分析。其稳定的荧光信号和良好的生物相容性使其成为生命科学领域中不可或缺的工具试剂。

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厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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