FITC-LCA 绿色荧光标记小扁豆凝集素

FITC标记小扁豆凝集素（LCA）——绿色荧光糖链识别探针

一、产品简介

FITC-LCA是将小扁豆凝集素（Lens culinaris agglutinin，LCA）通过共价结合方式标记上绿色荧光染料荧光素异硫氰酸酯（FITC）制备的荧光标记糖结合蛋白。LCA是一种来源于小扁豆的植物凝集素，具有对特定糖链结构尤其是富含岩藻糖和高甘露糖结构的高亲和力，广泛应用于糖蛋白的鉴定、细胞表面糖链研究及疾病相关糖修饰分析。通过FITC标记，LCA获得了强烈且稳定的绿色荧光信号，适合用于荧光显微镜、流式细胞术及其他荧光检测技术。

二、小扁豆凝集素（LCA）简介

来源：提取自小扁豆（Lens culinaris）种子；

分子结构：LCA为四聚体蛋白，分子量约26–28 kDa（单体）；

糖结合特异性：优先识别含岩藻糖（Fucose）和高甘露糖的寡糖结构，特别是N-连接糖链中的核心岩藻糖；

生物功能：

介导细胞间识别和结合；

用于糖蛋白的特异性检测；

在肿瘤细胞糖链变异研究中具有重要应用。

三、FITC标记原理与方法

FITC分子含有活性的异硫氰酸酯基团（–N=C=S），能与LCA蛋白的赖氨酸侧链氨基（–NH₂）共价结合，形成稳定的硫脲键；

标记过程温和，避免蛋白质构象破坏，大限度保持LCA糖结合活性；

通过纯化去除未结合的FITC，得到高纯度的FITC-LCA产品。

四、产品理化性质

性质 说明

外观 绿色荧光冻干粉或透明绿色液体

分子量 单体约26-28 kDa，四聚体约104-112 kDa

荧光特性 激发波长约495 nm，发射波长约520 nm（绿色荧光）

溶解性 良好溶于PBS、生理盐水及缓冲液

稳定性 避光、低温保存下荧光信号稳定

标记率（FITC/LCA） 通常为1-4 FITC分子/每个LCA四聚体

五、产品性能与特点

1. 高亲和性和特异性结合

FITC-LCA保持了LCA对含岩藻糖及甘露糖的高亲和性，能够准确识别糖蛋白及细胞表面相关糖基结构。

2. 强烈且稳定的绿色荧光

FITC的绿色荧光信号明亮且漂白性好，方便通过荧光显微镜、流式细胞术等进行高灵敏度检测。

3. 保持蛋白功能活性

标记条件温和，大程度保护LCA蛋白的三维结构及糖结合功能，确保实验可靠性。

4. 广泛的适用性

可用于细胞糖蛋白定位、组织切片染色、流式细胞术分析及糖链修饰研究，满足多样化实验需求。

六、主要应用领域

1. 细胞表面糖蛋白分析

利用FITC-LCA标记细胞表面的岩藻糖和高甘露糖糖基，分析细胞糖链表达状态；

适用于肿瘤细胞及免疫细胞表型的糖基化研究。

2. 组织免疫荧光染色

在组织切片中定位含特定糖链的糖蛋白，研究组织病理学变化；

与其他体或荧光探针配合，实现多重标记。

3. 流式细胞术分析

对细胞群体进行定量检测，分析细胞表面糖结构表达的异质性；

用于检测细胞分化状态和疾病相关糖修饰变化。

4. 糖蛋白纯化与鉴定

结合LCA的糖结合特性，辅助筛选和纯化含有特定糖基的糖蛋白。

5. 肿瘤及免疫研究

研究肿瘤细胞糖基化异常，揭示肿瘤发生发展机制；

探讨免疫细胞表面糖结构对免疫功能的影响。

七、使用方法与建议

1. 配制与保存

冻干粉用PBS或适当缓冲液复溶，浓度一般为0.1–1 mg/mL，使用前充分混匀；

避光保存，4°C冷藏短期保存，冻干状态可长期–20°C保存。

2. 实验操作

标准染色浓度需根据细胞类型及实验需求优化，常用浓度范围为1–20 μg/mL；

染色时间一般为30分钟至1小时，室温或4°C孵育均可；

染色后需用缓冲液充分洗涤，减少非特异性结合。

3. 注意事项

避免强光照射，减少荧光淬灭；

标记可能对结合活性有轻微影响，建议对比未标记LCA进行活性验证；

用于流式细胞术时，建议结合适当的阴性对照。

八、质量控制指标

检测项目 标准指标

外观 绿色冻干粉或透明液体

纯度 ≥95%

荧光性能 激发495 nm，发射520 nm，荧光强烈稳定

糖结合活性 保持≥90%原LCA糖结合能力

分子量 SDS-PAGE确认四聚体结构完整

溶解性 良好，无明显沉淀

九、包装规格

规格 包装形式 储存条件

0.5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

1 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

十、常见问题解答

Q1：FITC-LCA的激发和发射波长是多少？

A：激发波长约495 nm，发射波长约520 nm，呈明亮绿色荧光。

Q2：能否用于活细胞染色？

A：FITC-LCA可以用于活细胞表面糖蛋白的标记，但需要注意浓度和孵育时间，避免影响细胞活力。

Q3：染色后如何避免荧光淬灭？

A：避免长时间光照，实验过程中减少激光或强光源照射时间，使用漂白剂效果更佳。

十一、总结

FITC-LCA（绿色荧光标记小扁豆凝集素）结合了LCA高度特异的糖结合特性与FITC优异的绿色荧光性能，为细胞表面糖蛋白及糖链结构研究提供了强有力的工具。其稳定的荧光信号、优良的生物相容性和多样的应用前景，使其在肿瘤学、免疫学及糖生物学领域被广泛采用。

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厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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