Transferrin, FITC labeled
FITC标记转铁蛋白(Transferrin-FITC)——绿色荧光铁离子载体与细胞摄取研究工具
一、产品简介
FITC标记转铁蛋白(Transferrin, FITC-labeled)是一种将人源或动物源转铁蛋白(Tf)通过共价结合方式标记上绿色荧光染料荧光素异硫氰酸酯(FITC)的生物功能蛋白。转铁蛋白是一种结合铁离子的糖蛋白,广泛存在于血浆中,主要功能是结合和运输铁离子至细胞。FITC标记赋予转铁蛋白绿色荧光,实现其在细胞内摄取及转运过程中的动态追踪,广泛应用于细胞生物学、药物输送、受体研究和生物成像等领域。
二、转铁蛋白(Transferrin)简介
来源:天然存在于人类及多种哺乳动物血浆中;
分子结构:单链糖蛋白,分子量约80 kDa,含两价铁结合位点;
生理功能:
高效结合Fe³⁺离子并运输至细胞;
通过转铁蛋白受体(TfR)介导的受体介导性内吞作用进入细胞;
参与铁稳态调节,促进细胞生长和代谢;
生物学意义:
转铁蛋白受体高度表达于快速增殖细胞及某些肿瘤细胞,成为靶向治疗和诊断的热点;
作为药物及纳米载体的理想靶分子。
三、FITC标记原理与方法
标记原理:
FITC的异硫氰酸酯基团(–N=C=S)可与转铁蛋白赖氨酸残基上的自由氨基(–NH₂)共价结合,形成稳定的硫脲键;
标记过程控制温和,大程度保持转铁蛋白的三维构象和生物活性;
制备工艺:
在适宜pH缓冲液中,将FITC缓慢加入转铁蛋白溶液,轻柔搅拌反应一定时间;
通过透析或凝胶过滤去除游离FITC,获得纯净的FITC-转铁蛋白;
标记度:
标记度需适中,既保证足够荧光强度,又不影响转铁蛋白受体结合活性。
四、产品理化性质
性质 说明
分子量 约80 kDa
荧光特性 激发波长约495 nm,发射波长约520 nm(绿色荧光)
外观 绿色透明液体或冻干粉
溶解性 良好溶于PBS及其他生理缓冲液
稳定性 避光低温保存,荧光及蛋白质活性稳定
生物活性 保持转铁蛋白对转铁蛋白受体(TfR)的高亲和力
五、产品性能与特点
1. 高效受体结合能力
FITC标记转铁蛋白保留对TfR的高亲和性,可模拟天然转铁蛋白的细胞摄取机制,适用于受体介导的内吞研究。
2. 明亮稳定的绿色荧光
FITC标记使转铁蛋白具有强烈且稳定的绿色荧光信号,便于荧光显微镜、流式细胞仪及荧光成像追踪。
3. 良好的生物相容性
作为天然蛋白标记物,FITC-转铁蛋白对细胞毒性低,适合活细胞及体外实验。
4. 多样的实验适用性
可用于细胞摄取动力学、纳米药物靶向研究、受体表达分析及生物成像等多种科研领域。
六、主要应用领域
1. 受体介导的内吞机制研究
追踪转铁蛋白结合受体后进入细胞的过程,研究细胞摄取和转运动力学;
探索肿瘤细胞及快速增殖细胞中TfR的表达及功能。
2. 细胞摄取及靶向递送
作为药物或纳米载体表面标记,实现对受体富集细胞的靶向;
评估靶向系统的摄取效率和分布特征。
3. 流式细胞术分析
用于定量检测细胞表面TfR表达水平及细胞群体分析;
结合其他荧光体实现多参数检测。
4. 荧光显微镜及活体成像
通过荧光成像技术观察转铁蛋白在细胞和组织内的定位;
辅助疾病模型研究,如癌症、贫血及神经退行性疾病。
七、使用方法及建议
1. 配制与保存
冻干粉用无菌PBS缓冲液复溶,浓度一般为0.1–1 mg/mL;
避光、4°C冷藏保存,避免反复冻融,延长活性和荧光稳定性。
2. 实验操作
建议实验浓度根据细胞类型及实验需求优化,通常使用0.1–20 μg/mL范围;
染色时间一般为30分钟至1小时,室温或4°C孵育;
使用后充分洗涤,减少非特异性结合。
3. 注意事项
避免长时间强光照射,减少荧光淬灭;
标记过程可能对蛋白活性有轻微影响,建议实验前验证;
用于流式细胞术时设置合适的阴性对照及补偿参数。
八、质量控制指标
检测项目 标准指标
外观 绿色透明液体或冻干粉
纯度 ≥95%
荧光性能 激发495 nm,发射520 nm,荧光强度稳定
受体结合活性 保持≥90%原转铁蛋白受体结合能力
蛋白完整性 SDS-PAGE确认完整单体结构
细胞相容性 细胞存活率≥90%(常用细胞系)
九、包装规格
规格 包装形式 储存条件
0.5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存
1 mg 冻干粉 –20°C 避光保存
5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存
十、常见问题解答
Q1:FITC-转铁蛋白的激发和发射波长是多少?
A:激发波长约495 nm,发射波长约520 nm,呈明亮绿色荧光。
Q2:该产品适合用于活细胞实验吗?
A:是的,FITC标记的转铁蛋白适合活细胞摄取和受体介导内吞研究,但建议先测试细胞毒性。
Q3:如何延长荧光稳定性?
A:避免长时间光照,实验过程中使用漂白剂,并在避光环境中储存。
十一、总结
FITC标记转铁蛋白作为一种结合了天然蛋白质特异性和荧光追踪功能的生物试剂,在细胞生物学、药物靶向输送及分子成像领域具有重要价值。其保持了转铁蛋白与受体的高亲和性及优异的荧光性能,使得科研工作者能够方便地观察和量化细胞内铁代谢及受体介导的摄取过程,为疾病机制研究和新型治疗方案开发提供坚实工具。
西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务,覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料,满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。
西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制,灵活设计标记方案,快速响应客户需求。
厂家:西安齐岳生物科技有限公司
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!
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