文献：沉默 LCN2 可通过降低 EGFR 信号激活和循环来抑制口腔鳞状细胞癌进展

链接：https://link.springer.com/article/10.1186/s13046-023-02618-z

作者：黄子贤,奚锐,陈毅,陈永举,陈锐,梁延灿,王艳,姚维成,徐小丁&黄志全

节选：

G-NPs的制备

按照前期研究合成了两亲聚合物mPEG-SS-PLGA，然后将其溶于N,N′-二甲基甲酰胺（DMF）中，配制成浓度为20 mg/mL的均质溶液。随后，配制1 nmol siLCN2（0.1 nmol/µL水溶液）和50 µL G0C14（5 mg/mL DMF溶液）的混合物，然后与200 µL mPEG-SS-PLGA溶液混合。在剧烈搅拌（1000 rpm）下，将混合物滴加到5 mL去离子水中。将NP分散体转移至超滤装置（MWCO 100 kDa，Millipore）中，离心除去有机溶剂和游离化合物。用超纯水洗涤两次后，将得到的G-NP分散于1 mL超纯水中。采用动态光散射法（DLS，Malvern Zetasizer）测定粒径和zeta电位。用Tecnai G2 Spirit BioTwin透射电子显微镜（TEM）观察载皂素纳米粒子的形貌。观察前，样品用1%醋酸铀酰染色，并在空气中干燥。

为了测定siRNA的包封率（EE%），将Cy5标记的siLCN2按照上述方法包封到G-NP中。随后，取5 μL NP溶液与20倍二甲基亚砜（DMSO）混合。将5 μL裸露的Cy5-siLCN2（1 nmol/mL）与20倍DMSO混合，制备标准品。使用多功能酶标仪（TECAN SPARK 10 M）测量荧光强度，载体包封率计算为EE% = (FINP/FIStandard) × 100。EE%大于80%的NP用于后续实验。

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