英文名称：Ac-DEVD-pNA
中文名称：乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-对硝基苯胺

乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-对硝基苯胺（Ac-DEVD-pNA）是一种人工合成的四肽底物，常用于检测半胱天冬酶-3（Caspase-3）的酶活性。其结构中，N端乙酰基（Ac）保护肽链不被氨基肽酶降解，天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸（DEVD）序列是Caspase-3的特异性识别位点，C端对硝基苯胺（pNA）作为显色基团，在酶切后释放游离的pNA，其吸光度变化（通常在405 nm波长下测定）可定量反映Caspase-3活性。

Caspase-3是细胞凋亡执行阶段的关键蛋白酶，其活性变化与多种生理及病理过程密切相关。Ac-DEVD-pNA通过模拟细胞凋亡过程中Caspase-3的天然底物（如PARP蛋白），为体外研究提供了便捷的检测工具。例如，在药物筛选中，可通过测量处理后细胞裂解液中Caspase-3对Ac-DEVD-pNA的切割速率，评估化合物诱导凋亡的能力；在疾病机制研究中，该底物可用于分析组织样本（如心肌梗死模型心脏组织）中Caspase-3的激活水平，揭示凋亡在病理损伤中的作用。

Ac-DEVD-pNA的使用需注意反应条件的优化。例如，缓冲液pH（通常为7.2-7.6）、离子强度及二硫苏糖醇（DTT）等还原剂的添加可影响酶活性；反应时间需控制在线性范围内以避免底物耗尽。此外，其他Caspase家族成员（如Caspase-7）也可能切割DEVD序列，需结合抑制剂（如Ac-DEVD-CHO）进行特异性验证。目前，Ac-DEVD-pNA已成为细胞凋亡研究中的标准化试剂，广泛应用于基础医学及药物开发领域。

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