英文名称：Ac-YVAD-AMC
中文名称：乙酰-酪氨酸-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素

Ac-YVAD-AMC是一种荧光标记的四肽底物，专用于检测半胱天冬酶-1（Caspase-1）的酶活性。其结构中，N端乙酰基（Ac）保护肽链免受降解；酪氨酸-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸（YVAD）序列为Caspase-1的特异性切割位点；C端7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）作为荧光基团，在未被切割时因共轭结构荧光较弱，酶切后释放游离AMC，其荧光强度（激发波长380 nm，发射波长460 nm）显著增强，可通过荧光分光光度计或微孔板阅读器定量检测。

Caspase-1在炎症反应中发挥核心作用，其活性变化与多种炎症性疾病（如类风湿关节炎、炎症性肠病）密切相关。Ac-YVAD-AMC通过提供高灵敏度的荧光检测手段，成为研究Caspase-1功能的重要工具。例如，在单核细胞或巨噬细胞刺激实验中，可通过测量细胞裂解液中Caspase-1对Ac-YVAD-AMC的切割活性，评估炎症小体（如NLRP3）的激活状态；在药物筛选中，该底物可用于检测化合物是否通过抑制Caspase-1活性降低炎症因子（如IL-1β）的释放。

使用Ac-YVAD-AMC时需优化实验条件以提高准确性。反应缓冲液需包含适当浓度的DTT以维持酶活性，同时避免过高浓度干扰荧光检测；反应温度（通常37℃）及时间需根据样本类型调整，以确保荧光信号与酶活性呈线性关系。此外，需通过添加特异性抑制剂（如Ac-YVAD-CHO）验证信号特异性，排除其他蛋白酶（如Caspase-4/5）的干扰。目前，Ac-YVAD-AMC已广泛应用于细胞生物学、免疫学及药理学研究，为理解炎症相关疾病的分子机制提供了关键技术支撑。

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