产品名称：FITC-D-Lys，异硫氰酸荧光素标记赖氨酸的光谱特性与稳定性

一、化学结构与合成

化学结构

FITC（异硫氰酸荧光素）：分子量389.4，核心为氧杂蒽环，含异硫氰酸酯基团（-N=C=S）。

D-赖氨酸：分子式C₆H₁₄N₂O₂，D型氨基酸，手性中心（α-碳）保留。

连接方式：FITC的异硫氰酸酯基团与D-赖氨酸的ε-氨基（-NH₂）通过亲核加成反应形成稳定的硫脲键（-NH-C(=S)-NH-），生成分子式C₂₇H₂₅N₃O₇S，分子量约535.57。

合成步骤

FITC活化：无需额外活化，异硫氰酸酯基团直接反应。

D-赖氨酸处理：溶解于pH 8.0-9.0的碳酸氢钠缓冲液，游离氨基。

偶联反应：避光条件下，FITC溶液缓慢加入D-赖氨酸溶液，室温搅拌1-2小时。

终止与纯化：加入甘氨酸封闭未反应位点，通过超滤、透析或HPLC纯化，纯度＞95%。

二、光谱特性与稳定性

光谱特性

激发波长：490-495 nm（最大495 nm）。

发射波长：520-530 nm（最大520 nm），黄绿色荧光。

荧光强度：量子产率高，适合低丰度靶标检测。

pH依赖性：荧光强度在pH＞7时增强，碱性环境更稳定。

稳定性与储存

短期储存：2-8℃避光保存，有效期数周。

长期储存：-20℃冷冻保存，避免反复冻融。

注意事项：避光操作防光漂白；缓冲液可添加BSA或甘油提高稳定性。

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