Biotin 11-dUTP是一种生物素标记的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)衍生物,广泛用于分子生物学领域,尤其是核酸标记和检测技术。它通过在脱氧尿苷三磷酸分子的碱基环上连接含有11个碳原子的生物素基团,使其在DNA合成过程中能够被DNA聚合酶有效掺入,进而实现DNA的生物素标记,为后续的检测和纯化提供便利。英文名 Biotin-11-dUTP
CAS号 1221498-88-9
分子量 858.73
分子式 C30H49N6O15P3S
化学结构及特点
核心骨架
Biotin 11-dUTP基于脱氧尿苷三磷酸(dUTP),是一种DNA合成中的核苷酸前体。其结构包含一个脱氧核糖、尿嘧啶碱基和三磷酸基团,支持DNA链的延伸。
生物素标记
在尿嘧啶碱基的11位位置通过一个11个碳原子的链(spacer arm)连接生物素分子。该长链间隔子保证了生物素基团在标记DNA时不会显著影响DNA的结构和功能,同时为后续的结合反应提供空间,减少空间位阻效应。
生物素功能
生物素是一种维生素(维生素H),能够与亲和素(streptavidin)或鲑鱼凝集素(avidin)形成高亲和力的非共价结合,形成稳定的复合物,用于高灵敏度的检测、纯化和定位。
主要功能与应用
DNA标记和检测
Biotin 11-dUTP可在体外PCR扩增、原位杂交(FISH)、末端标记和随机引物扩增中替代天然dUTP或dTTP掺入DNA链,实现DNA的生物素标记。随后通过亲和素-酶结合物(如辣根过氧化物酶HRP、碱性磷酸酶AP)或荧光标记亲和素进行信号放大和检测。
分子探针制备
生物素标记的DNA探针在核酸杂交技术中应用广泛,用于检测特定DNA或RNA序列,支持基因表达分析、基因定位及突变检测等研究。
亲和纯化
利用生物素-亲和素的高亲和力,可以通过亲和素包被的磁珠或柱子对标记的DNA片段进行特异性纯化和富集。
免疫组织化学和细胞成像
在原位杂交和细胞核酸检测中,标记的核酸分子可通过生物素结合实现高灵敏度定位和成像,揭示基因表达和分子分布。
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