Cy3.5-modified Trehalose,CY3.5标记的海藻糖的反应机理
海藻糖(Trehalose)是一种非还原性双糖,由两个α-葡萄糖分子通过α,α-1,1-糖苷键连接组成,具有良好的生物稳定性和蛋白保护作用。CY3.5-modified Trehalose 是通过化学方法在海藻糖分子上引入红荧光染料CY3.5,主要用于成像示踪和细胞内运输研究。由于海藻糖为非还原性糖,其直接标记需借助预修饰步骤或借助链接臂。
反应机理主要包括以下几个阶段:
羟基修饰(引入胺基):海藻糖上存在多个伯羟基,通过氨基化衍生策略可在6位或2位羟基上引入氨基,如使用碳二亚胺/胺类试剂或甲酰化/还原胺化等方式。常见方法是通过三氟乙酸酐(TFAA)保护部分羟基后,在其余位点进行选择性修饰。
CY3.5染料活化:CY3.5通常通过NHS酯形式提供,该结构与伯胺基团发生亲核取代反应生成酰胺键。若使用自由羧基型CY3.5,需EDC/NHS预激活。
形成共价键:活化后的CY3.5-NHS与修饰后的Trehalose-NH₂在pH 7.4条件下反应,形成稳定的酰胺键,标记位点一般为糖分子的6-羟或衍生位。
清除副产物:反应完成后通过透析、HPLC或Sephadex层析去除未反应的染料及杂质。纯化产物表现出荧光发射峰在570~590 nm,保留海藻糖的水溶性。
该标记反应的实质为亲核取代反应(NHS酯与伯胺),属于典型的酰胺键偶联反应,是构建荧光碳水化合物探针的经典方法。由于海藻糖稳定、抗酶解,与CY3.5标记后适合用于细胞应激研究、冷冻保护成像、生物材料可视化等多个领域。
产品名称:Cy3.5-modified Trehalose
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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