文献:Preparation and Characterization of Folate-Targeted Fe3O4 Nanoparticle Codelivering Cisplatin and TFPI-2 Plasmid DNA for Nasopharyngeal Carcinoma Therapy
作者:Juan Zhang, Huanhuan Weng, Xiangwan Miao, Quanming Li, Siqi Wang, Huifen Xie, Tao Liu, Minqiang Xie
文献链接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1155/2017/2849801
摘要:
(1) FA-PEG-PEI的1HNMR和FT-IR光谱。 5 mg FA-PEG-PEI用氘代过氧化物(D2O)稀释,然后在Gemini-200光谱仪上通过氢核磁共振(1HNMR)光谱进行表征。使用Perkin-Elmer分光光度计在4000至500的光谱范围内进行FT-IR光谱分析 室温下为cm-1。
(2) 理化性质FA-PEG-PEI@SPION-CDDP-TFPI-2.其形态结构和粒径FA-PEG-PEI@SPION-CDDP-TFPI-2通过透射电子显微镜(TEM)研究了配合物。TEM样品制备如下:将稀释的样品滴加入碳支撑膜复制品中,然后用磷钨酸进行负染,最后干燥至可见。通过Malvern激光粒度分析仪接收络合物的Zeta电位和流体动力学直径。磁化是通过振动样品磁强计在-10℃的范围内测量的 kOe至10 25°C时的kOe。
(3) 凝胶电泳FA-PEG-PEI@SPION-CDDP-TFPI-2复合体。TFPI-2与FA-PEG-PEI@SPION-CDDP通过凝胶电泳限制性分析。首先,将含有溴化乙锭(0.5 ug/ml,Sigma)的琼脂糖凝胶(1.0%,w/v)固化20分钟 min,然后将其置于TAE缓冲液(2 mmol/L EDTA,40 mmol/L三乙酸盐)。
第(一)节:FA-PEG-PEI@SPION-CDDP/将不同质量比(1:4、1:2、1:1、2:1、4:1)的TFPI-2复合物孵育30分钟 在室温下放置min,然后在60℃下进行电泳 mV为1 h直至实现分离。
第(二)节:研究该组合物的DNase降解效果,FA-PEG-PEI@SPION-CDDP混合过量TFPI-2与不同含量的DNase-I(10、15、20和25单位)孵育30分钟 分钟(120转/分钟,37°C)。然后加入EDTA(4ul,250 mM)和SDS溶液(4ul,10%)分别加入,再孵育一小时,然后进行电泳以探索DNA的完整性。使用GelDoc系统通过紫外线盒实现可视化和照片捕获。
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