英文名 TFAX 488, SE
CAS号 222164-96-7
分子量 659.453
分子式 C25H15N3O13S2Li2
Alexa Fluor 488 NHS Ester(AF488 NHS Ester)是一种绿色荧光染料的活性酯形式,具有光稳定性、荧光强度以及生物相容性。它通过NHS(N-hydroxysuccinimide)酯活性基团专一性地与蛋白质、肽、多糖、核酸等生物大分子中的伯胺(–NH₂)反应,形成稳定的酰胺键,从而实现高效、持久的荧光标记。
作为Alexa Fluor系列的一员,AF488 在生命科学领域中被广泛应用于荧光显微镜、流式细胞术、免疫荧光、Western blot、原位杂交(FISH)、荧光示踪、定量分析等多种荧光相关实验。
主要应用
1. 蛋白质标记
AF488 NHS Ester 可用于标记抗体、酶、受体蛋白、转运蛋白等含有伯胺结构的蛋白质,不影响其生物活性,适用于:
荧光免疫染色(IF)
荧光原位杂交(FISH)
Western blot 二抗标记
蛋白质追踪与定位分析
2. 细胞与组织标记
AF488 标记的抗体或探针可用于活细胞或固定细胞的标记与显微观察,尤其适合多重染色成像,与红色或远红染料(如AF594、AF647)配对使用,信号清晰、分辨率高。
3. 流式细胞术(FACS)
Alexa Fluor 488 发射波长与常见的 FITC 类似,但荧光强度与光稳定性均优于FITC,是流式抗体标记中的优选荧光基团,适用于免疫表型分析、细胞周期检测、凋亡分析等。
4. 核酸、寡核苷酸标记
通过AF488 NHS酯对含氨基修饰的寡核苷酸进行荧光标记,可制备特异性荧光探针,用于RNA探针、DNA杂交、基因表达分析等分子生物学应用。
5. 纳米颗粒与生物材料表面修饰
AF488 NHS Ester 还常用于修饰具有表面伯胺的纳米颗粒、聚合物微球、水凝胶、表面功能化玻片等,提升其可视化或追踪功能。
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