CY3.5-Isomaltotetraose,CY3.5标记异麦芽四糖的合成路线
CY3.5标记异麦芽四糖(CY3.5-Isomaltotetraose)是一种结构由四个 α-(1→6)连接的葡萄糖单元组成的低聚糖,通过化学方式引入荧光染料Cy3.5后,可作为示踪探针用于生物体内碳水代谢、菌群生态及转运研究。其合成路线可分为两大部分:四糖主体的制备及Cy3.5染料的定向偶联。
一、异麦芽四糖的合成
酶催化合成
使用α-葡萄糖苷转移酶(GTF)对麦芽糖或异麦芽糖进行酶促反应,在适当的底物浓度和反应时间条件下,可获得不同长度的低聚糖。异麦芽四糖在反应产物中浓度较高。
纯化分离
产物经过Sephadex G-15凝胶过滤或离子交换HPLC层析进行分离,获得纯度大于95%的异麦芽四糖,可进一步通过质谱和NMR鉴定确认结构。
二、Cy3.5染料的偶联合成路线
还原端胺基化处理
糖类偶联一般需要在其还原端引入氨基团。采用还原胺化法将还原端醛基与乙二胺缩合生成稳定的胺端糖,为荧光偶联提供功能基团。
Cy3.5活化
Cy3.5染料一般以活性酯(如NHS酯)形式使用,适合与伯胺发生酰胺化反应。
共价偶联反应
将氨基化的异麦芽四糖与Cy3.5-NHS酯在碳酸盐缓冲液中反应,避光条件下搅拌反应4-8小时。反应完成后通过透析或层析去除游离染料。
纯度分析与鉴定
终产物通过UPLC、UV-Vis吸收光谱(Cy3.5峰位约为570 nm)、质谱分析等确认结构与标记效率。
产品名称:CY3.5-Isomaltotetraose
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc