CY3.5-Isomaltose,CY3.5标记异麦芽糖的合成步骤
CY3.5标记异麦芽糖(CY3.5-Isomaltose)是一种由两个葡萄糖单元通过 α-(1→6) 糖苷键连接的二糖结构,通过共价引入红色荧光染料Cy3.5后,可作为简明糖类荧光探针用于生物识别。其合成步骤可分为如下几个阶段:
步:异麦芽糖的获取
异麦芽糖可通过对淀粉或麦芽糖进行酶解反应获得,使用转葡萄糖苷酶(如Dextranse)可特异性产生α-1,6二糖。纯化过程包括:
活性炭脱色;
凝胶过滤柱(如Sephadex G-10)分离;
HPLC或TLC检测确认纯度。
第二步:糖分子修饰
糖类缺乏可反应的氨基团,需进行化学修饰。常采用还原胺化法,使用乙二胺或肼将糖分子还原端醛基转化为胺基。例如,将异麦芽糖与乙二胺及NaBH₃CN共温育8小时,引入伯胺结构。
第三步:Cy3.5染料的引入
选用Cy3.5-NHS酯型染料,其对伯胺反应具有良好的专一性。将其溶解在DMSO中后缓慢加入到含修饰糖的PBS缓冲液中,在避光、pH 8.0条件下反应4~6小时,形成稳定的酰胺键连接。
第四步:产物纯化
采用透析(MWCO 1000 Da)或C18固相萃取法去除未反应的Cy3.5。终使用HPLC验证产物纯度,检测吸收峰(570 nm)与糖信号共同存在。
第五步:性质确认
通过UV-Vis谱图(确认Cy3.5标记)与质谱(确认糖链质量)分析判断偶联效果;并可通过荧光显微镜或流式细胞仪初步应用验证。
产品名称:CY3.5-Isomaltose,CY3.5标记异麦芽糖
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23