Cy3-dCTP，花菁类荧光染料CY3共价连接至脱氧胞苷三磷酸的反应步骤

Cy3-dCTP 是将花菁类荧光染料 CY3 共价连接至脱氧胞苷三磷酸（dCTP）分子上的荧光核苷酸衍生物，应用于分子生物学实验，如荧光原位杂交（FISH）、荧光PCR、DNA合成标记、测序等。该标记形式通过在碱基或糖环结构上引入荧光团，实现对核酸合成或模板识别过程的可视化分析。

CY3-dCTP 的合成通常采用核苷酸修饰策略，在保持 dCTP 三磷酸骨架完整性的基础上，引入一个连接基团（如氨基烷基链或氨基酯链）作为染料偶联位点。常用的策略是在 dCTP 的 5-位碱基上引入氨基链（如 aminoallyl-dCTP），再通过与 CY3-NHS 酯进行后期修饰形成酰胺键。

具体反应步骤如下：

合成氨基修饰核苷酸：以脱氧胞苷为起始物，通过在其C5位引入一个氨基烷基侧链，得到 aminoallyl-dCTP。该中间体既保持核苷酸原有的碱基配对能力，又引入一个活泼伯胺，用于后续标记。

CY3-NHS 酯制备与活化：CY3通过与N-羟基琥珀酰亚胺反应形成NHS活酯，使染料具备与胺反应的能力。该酯在干燥有机溶剂（如DMSO）中配制，以保持其活性。

偶联反应：将 aminoallyl-dCTP 溶解于碳酸盐缓冲液（pH 8.5），加入适量 CY3-NHS 酯（通常以1.2–1.5倍摩尔量），在避光条件下温和反应 2–4 小时，生成稳定的 CY3-dCTP。整个过程需严格避免金属离子污染和强氧化环境，以防止核苷酸降解。

纯化过程：反应后使用离子交换色谱或反相HPLC分离纯化，去除未反应染料、缓冲盐及副产物。纯品可进一步冻干保存，确保其三磷酸结构稳定。

验证与储存：通过质谱、核磁共振（NMR）及紫外-可见光谱（UV-Vis）进行结构鉴定，确认荧光团成功引入。CY3-dCTP 需冷冻避光储存（-20°C以下），以维持荧光强度及核苷酸稳定性。

该标记核苷酸可被DNA聚合酶识别并掺入新合成的链中，保留其荧光性质，适用于高灵敏度的分子追踪实验，具有的实验室应用价值。

产品名称：Cy3-dCTP，花菁类荧光染料CY3共价连接至脱氧胞苷三磷酸

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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