AF488 Tyramide(Alexa Fluor 488 Tyramide,中文常称为Alexa Fluor 488酪胺)是一种高灵敏度、可扩增信号的荧光标记试剂,广泛应用于免疫组化(IHC)、原位杂交(ISH)、免疫荧光染色、tSA(tyramide signal amplification,酪胺信号放大)等技术中。
该试剂结合了明亮的绿色荧光染料Alexa Fluor 488和酪胺(tyramide)结构单元,可通过过氧化物酶(如HRP)催化的反应共价附着到靶标附近的酪氨酸残基上,从而实现高度特异的信号放大。
名称:AF488 Tyramide(AlexaFluor488酪胺)
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
分子结构与工作原理
AF488 Tyramide由两部分组成:
Alexa Fluor 488染料:Alexa Fluor系列染料因其出色的光稳定性和高量子产率而广受欢迎。Alexa Fluor 488的激发波长为495 nm,发射波长为519 nm,发出明亮的绿色荧光,适合与FITC滤光片组兼容。
酪胺结构(Tyramide):一种苯乙胺结构,可在辣根过氧化物酶(HRP)催化下被活化为高反应性的自由基,进而与附近的蛋白质分子中的酪氨酸残基共价结合。
该试剂的反应机理如下:
在HRP存在下,AF488 Tyramide被H₂O₂氧化,产生自由基;
活化的AF488 Tyramide自由基与靶标周围组织蛋白质中的酪氨酸残基发生共价键合;
实现荧光染料的稳定沉积,从而增强局部荧光信号。
主要优势
信号放大显著
相比传统荧光抗体直接标记方法,AF488 Tyramide在HRP酶和H₂O₂的作用下可将大量荧光分子沉积到靶标区域,实现数十倍至百倍的信号增强。
高空间分辨率
酪胺自由基反应具有扩散距离(约几纳米),避免了荧光信号的空间扩散,提供更清晰的组织或细胞定位。
出色的荧光性能
Alexa Fluor 488具有光稳定性和荧光强度,在荧光显微镜或流式细胞仪等设备中表现优异,适用于多重标记实验。
共价标记,信号稳定
标记后的荧光信号为共价键合,不易脱落,可用于长期成像、组织切片长期保存及重复检测。
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