CY3-Uroplakin,CY3标记尿路上皮蛋白的反应步骤
产品名称:CY3-Uroplakin,CY3标记尿路上皮蛋白
纯度:95%+
CY3标记的尿路上皮蛋白(Cy3-Uroplakin)制备通常通过CY3活性酯与尿路上皮蛋白分子上的氨基基团共价偶联完成。尿路上皮蛋白属于膜蛋白家族,含有多个赖氨酸残基,为染料标记提供了反应位点。
反应步骤开始于尿路上皮蛋白的缓冲液配置,常采用pH 8.0至8.5的碳酸盐缓冲液,以确保蛋白氨基处于非质子化状态,提高亲核活性。蛋白溶液需新鲜配制,保证蛋白结构稳定。
随后,溶解于有机溶剂中的CY3-NHS酯缓慢滴加至蛋白溶液中,同时持续轻柔搅拌。反应一般在室温下避光进行,持续时间为1至3小时,根据标记需求调整。适当的反应条件有利于实现高效偶联,同时保持蛋白的构象。
反应结束后,采用透析、凝胶过滤色谱或超滤等方法去除游离的未反应染料及小分子杂质,获得高纯度的标记蛋白。纯化步骤对保持蛋白功能和减少背景信号至关重要。
纯化后的Cy3-Uroplakin通常通过紫外-可见分光光度计测定标记度和蛋白浓度,并利用荧光光谱分析确认荧光性质。SDS-PAGE结合荧光扫描可用来验证标记的均一性和纯度。
整个过程强调温和的反应条件和精确的纯化工艺,以确保标记蛋白的功能活性和结构完整性。通过合理控制染料与蛋白的摩尔比,可以调节标记度,实现不同实验需求。
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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