Rhodamine X Amine,简称氨基ROX,是一种衍生自罗丹明(Rhodamine)染料的含氨基官能团的荧光化合物。ROX染料属于罗丹明类荧光染料家族,具有光学性能和良好的化学稳定性,常被用作荧光探针、分子标记和荧光定量分析中的标准染料。
氨基ROX特指该染料分子上带有可反应的游离氨基(–NH2)功能团,为其后续的共价偶联提供了化学活性,使其能方便地与多种生物大分子或材料连接。
化学结构与性质
分子结构
Rhodamine X是一类结构基于罗丹明的红色荧光染料,具有典型的三苯基甲烷类共轭结构,赋予其强烈的红色至橙红色荧光。氨基ROX在分子结构上引入了一个游离的氨基基团(–NH2),该基团通常位于染料的侧链位置,为后续的化学修饰、标记提供了反应位点。
物理化学性质
氨基ROX呈现良好的水溶性,具体取决于其盐形式及溶剂环境。其激发与发射波长集中在可见光红色区域,具备高荧光量子产率和良好的光稳定性。
活性基团
游离氨基是亲核基团,能够与多种活性化学基团(如NHS酯、异氰酸酯、异氟酸酯等)发生共价反应,实现分子的衔接与标记。
主要应用
分子标记与偶联
氨基ROX因带有游离氨基,常用于与活化的羧基(–COOH)基团结合,通过酰胺键实现共价偶联。它可以标记蛋白质、多肽、核酸、抗体、载体分子等,成为分子探针和荧光标记工具。
荧光定量PCR(qPCR)探针
ROX染料常用作荧光参照染料(passive reference dye),帮助校正荧光信号变化,提高qPCR检测的准确性和重复性。氨基ROX的稳定性和强烈荧光使其成为优质的标准染料。
荧光传感器与生物传感器
氨基ROX被用于设计荧光传感器,通过共价连接特定识别元件,实现对环境变化、离子浓度、酶活性等的敏感检测。
细胞及组织成像
通过与生物分子的偶联,氨基ROX标记的探针可用于细胞内定位、追踪和动态观察,广泛应用于荧光显微镜、流式细胞术和活体成像。
多色荧光分析
ROX染料的光谱特性使其能够与蓝色、绿色及黄绿色荧光染料组合,进行多通道、多重标记的荧光实验。
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