Cy3-labeled,CY3标记的铜蓝蛋白的合成及纯化过程
产品名称:Cy3-labeled,CY3标记的铜蓝蛋白
纯度:95%+
CY3标记的铜蓝蛋白(CY3-labeled blue copper protein)是一类将花菁染料CY3共价连接于铜蓝蛋白上的荧光复合物,常用于金属蛋白动力学研究、电子转移路径追踪及生物材料构建等应用。铜蓝蛋白(如植物蓝铜蛋白、细菌类杯红素等)通常为分子量10–20 kDa的小型金属蛋白,内部配位一个铜离子,具备稳定的β-折叠结构和保守的配位环境,适于进行温和的化学修饰。
CY3的NHS酯形式可在中性至微碱性条件下与蛋白中赖氨酸残基的ε-氨基反应形成酰胺键,标记步骤通常在pH 7.5–8.5的缓冲液中进行。为防止铜中心被还原或螯合,反应体系需避免使用强还原剂和螯合剂。染料与蛋白的摩尔比应进行优化,以调控标记密度,防止蛋白构象过度扰动。
反应完成后,通过凝胶过滤层析(如Sephadex G-25)或超滤方式去除未反应的染料和小分子杂质。纯化产物可使用紫外-可见光谱监测其在280 nm和550 nm的吸收峰,进一步通过SDS-PAGE及荧光成像确认标记的蛋白分布及纯度。
表征方面,可应用电喷雾质谱(ESI-MS)或MALDI-TOF技术测定蛋白标记后的分子量变化,辅助分析结合位点和标记程度。同时,可通过电子顺磁共振(EPR)或循环伏安法评估标记对铜配位中心的影响,确保金属电子特性保持稳定。
整体而言,该合成及纯化流程支持在保留蛋白原有功能的基础上,引入稳定荧光标签,有助于在不干扰其电子转移行为的前提下进行结构功能研究与动态追踪。
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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