AF555 Maleimide它结合了Alexa Fluor 555的优异光学性能和马来酰亚胺(maleimide)基团的特异性反应活性,专门用于选择性标记含有巯基(-SH)基团的生物大分子,如蛋白质和肽链中的半胱氨酸残基。
这种特异性结合使AF555 Maleimide成为研究蛋白质结构、相互作用和动态变化的强有力工具,广泛应用于荧光成像、流式细胞术、单分子荧光实验及生物传感器的构建。
化学结构与反应特性
AF555 Maleimide由Alexa Fluor 555染料核心结构与一个马来酰亚胺基团组成。马来酰亚胺是一种具有高度选择性的官能团,能在温和的条件下与蛋白质或其他分子中的巯基(-SH)发生加成反应,形成稳定的硫醚键。
这种反应的特点包括:
高特异性:只与自由的巯基反应,不与氨基、羧基等其他常见官能团结合,保证标记的选择性。
快速且高效:在pH 6.5-7.5的缓冲液中,标记反应迅速完成。
生成稳定共价键,标记后的分子在多种条件下均稳定存在。
主要应用领域
蛋白质及肽类标记
AF555 Maleimide可以用于标记蛋白质中的半胱氨酸残基,实现荧光探针的制备。这对于研究蛋白质折叠、构象变化、相互作用等具有重要意义。
细胞膜蛋白标记
由于许多膜蛋白含有暴露的巯基残基,AF555 Maleimide可用于特异性标记细胞膜蛋白,辅助细胞成像和功能研究。
流式细胞术(Flow Cytometry)
通过标记细胞表面或胞内含巯基的分子,AF555 Maleimide支持多参数细胞分析。
单分子荧光成像和超分辨率显微镜
优异的光稳定性使其适合于高精度的单分子定位和动态追踪研究。
荧光共振能量转移(FRET)探针构建
通过与其他荧光染料共用,可构建FRET对,用于研究分子间距离和相互作用。
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