氨基活化偶联介质可用于各种含有羧基的亲和配基（蛋白质、多肽、糖等）的偶联，。EAH-activated QZT4FF活化偶联介质以较高流速琼脂糖凝胶为基质，经过一系列的活化步骤，形成活化氨基，在温和的条件下就可以偶联各种带羧基的配基。EAH-activated QZT4FF活化介质具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广的特点。

氨基活化介质的理化性质和产品特性如表1所示。

氨基活化偶联介质(EAH-activated)的应用

EAH-activated活化偶联介质用于各种含有氨基的亲和配基（蛋白质、多肽、糖等）的偶联。具体的操作步骤如下（以4 ml活化胶偶联BSA为例）：

（1）将约4 ml EAH活化胶水洗3-5次后抽干，再用pH 4.5的稀HCl溶液清洗2次，抽干后将4 ml EAH活化胶（约3.0 g）加入到10 ml的反应器（磨口三角瓶或离心管）中，备用。

（2）准确称取40 mg BSA溶于4.0 ml稀HCl，pH 4.5溶液，溶解完全后加入84 mg EDC.HCl，溶解完全后测量其pH是否为4.5，否则需调到4.5，备用。

（3）将BSA溶液加入到活化胶中，反应温度恒定在4℃或25℃，摇床中振荡混合（离心管水平放置），转速120 rpm，反应时间24 h（反应前1小时pH有明显的下降，可在15、30、45、60 min时测量pH并加入适量0.1M NaOH调pH至4.5）。

（4）反应停止后，静置，取上清离心（1000 g，5 min，室温），收集上清液用于未偶联BSA的浓度分析，计算偶联的BSA的配基密度；将其余料液转移到G3砂芯漏斗中用去离子水清洗、抽干。

（5）封闭未反应的EAH：一般不需要封闭，如需封闭未反应的氨基，可在偶联反应后（注意是在清洗前）直接往反应物中加入4.2 ml 1 M 乙酸（醋酸），继续反应4 h。反应停止后将料液转移到砂芯漏斗中抽干，用去离子水清洗。

（6）清洗

将制得的BSA琼脂糖凝胶依次用5倍的去离子水、0.1 M 含0.5 M NaCl的乙酸-乙酸钠缓冲液（pH 4.0）、去离子水、0.1M 含0.5 M NaCl的硼酸-四硼酸钠缓冲液（pH 8.0）和去离子水充分洗涤（重复清洗3次），抽干，去除未反应的配基。

（7）保存

制得的BSA亲和介质保存于4℃、20%乙醇溶液中。

备注：其他配基的偶联方法与BSA类似，但反应条件（温度（4 ^oC至室温）、时间（4-24 h）、配基加入量）需要根据配基的特性和应用的需求进行适当调整。

注意事项：通常用稀盐酸作为偶联溶液，如果选用缓冲液要避免使用含有氨基、羧基、磷酸基的缓冲液。

西安齐岳生物提供各种含有氨基的小分子peg linker产品:

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Azido-PEG1-aminecas:464190-91-8

Azido-PEG2-aminecas:166388-57-4

Azido-PEG3-aminecas:134179-38-7

AMINE-PEG4-OHcas:86770-74-3

H2N/Amino-PEG2-COOH cas:791028-27-8

H2N/Amino-PEG3-COOHcas:784105-33-5

H2N/Amino-PEG4-COOHcas:663921-15-1

H2N/Amino-PEG5-COOHcas:1191078-74-6

H2N/Amino-PEG6-COOHcas:905954-28-1

H2N/Amino-PEG8-COOHcas:756526-04-2

H2N/Amino-PEG9-COOHcas:1191079-83-0

H2N/Amino-PEG10-COOHcas:196936-04-6

H2N/Amino-PEG12-COOHcas:196936-04-6

H2N/Amino-PEG7-COOHcas:

H2N/Aminooxy-PEG3-acid HCl saltcas:1807540-79-9

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H2N/Aminooxy-PEG2-alcoholcas:185022-12-2

H2N/Aminooxy-PEG4-alcoholcas:106492-60-8

H2N/Aminooxy-PEG2-methanecas:54149-49-4

H2N/Aminooxy-PEG7-methanecas:1370698-27-3

H2N/Aminooxy-PEG8-methane HCl saltcas:2055024-52-5

H2N/Aminooxy-PEG3-t-butyl estercas:1835759-72-2

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H2N/Aminooxy-PEG3-methanecas:248275-10-7

H2N/Aminooxy-PEG3-thiol HCl saltcas:1200365-63-4

H2N/Aminooxy-PEG3-NH-Boccas:2062663-65-2

Aminooxy-PEG2-azidecas:1043426-13-6

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