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Cy5-Vimentin ,花菁素染料cy5标记波形蛋白的基本概念与组成
发布时间:2025-08-05     作者:wyh   分享到:

产品名称:Cy5-Vimentin ,花菁素染料cy5标记波形蛋白的基本概念与组成

一、基本概念与组成

Cy5荧光染料:

荧光特性:Cy5是一种花菁素类荧光染料,具有明亮的远红外荧光,其激发波长通常在640-650nm左右,发射波长在660-670nm之间。这种长波长荧光具有较低的背景干扰和较高的组织穿透力,适用于深层组织成像和多重荧光染色。

化学稳定性:Cy5染料具有较高的化学稳定性,能够在多种反应条件下保持其荧光特性,使得标记后的分子在后续实验中能够稳定地发出荧光信号。

光稳定性:相比一些其他荧光染料(如FITC),Cy5具有更好的光稳定性,能够在长时间的荧光检测中保持稳定的荧光信号,减少光漂白对实验结果的影响。

波形蛋白(Vimentin):

生物学功能:波形蛋白是一种中间丝蛋白,广泛存在于间充质细胞(如成纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞等)中。它在维持细胞形态、细胞迁移、细胞分裂和细胞内物质运输等过程中发挥重要作用。

表达变化:波形蛋白的表达水平与细胞分化状态、肿瘤发生和发展等密切相关。例如,在上皮-间充质转化(EMT)过程中,波形蛋白的表达上调,而上皮细胞标志物的表达下调。

Cy5-Vimentin ,花菁素染料cy5标记波形蛋白

二、Cy5-Vimentin的制备与标记原理

制备方法:

化学标记法:通常使用Cy5-NHS(Cy5的N-羟基琥珀酰亚胺活性酯)作为标记试剂,与波形蛋白中的赖氨酸残基的氨基发生酰胺化反应,形成稳定的酰胺键,从而实现Cy5对波形蛋白的标记。

标记效率优化:为了提高标记效率,可以优化反应条件(如pH值、反应时间、反应温度、试剂浓度等),并使用适当的纯化方法(如透析、凝胶过滤、色谱法等)去除未反应的Cy5-NHS和副产物。

标记原理:

特异性反应:NHS活性酯能够特异性地与氨基反应,实现了对波形蛋白中特定氨基酸残基的精准标记。

荧光信号传递:标记后的波形蛋白保留了其原有的生物学功能,同时能够通过Cy5的荧光特性在荧光显微镜或流式细胞仪等设备中发出远红外荧光,从而实现对波形蛋白的定位和定量检测。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh


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Cy5-Vimentin ,花菁素染料cy5标记波形蛋白

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