CY3牛血清白蛋白 CY3-BSA的制备工艺
CY3-牛血清白蛋白(CY3-BSA,Cyanine3-Bovine Serum Albumin)**是一种通过化学方法将荧光染料Cyanine3(CY3)共价偶联到牛血清白蛋白(BSA)分子上的标记蛋白。该复合物兼具BSA的生物化学稳定性和CY3的优良荧光性能,应用于蛋白质追踪、细胞成像、免疫检测及生物材料功能化等科研领域。
牛血清白蛋白(BSA)基本信息
牛血清白蛋白是一种单体球状蛋白,分子量约66.5 kDa,结构稳定且含有丰富的赖氨酸残基。赖氨酸侧链上的ε-氨基为CY3染料的NHS酯基团提供了理想的结合位点。BSA水溶性好,结构稳定,且成本较低,常作为蛋白标记的标准载体。
Cyanine3染料基本信息
Cyanine3(CY3)是一种宽应用于荧光标记的合成花青染料。其激发波长约为550 nm,发射波长约为570 nm,呈现红橙色荧光。CY3的光稳定性较好,荧光亮度高,适配常用的荧光显微镜、流式细胞仪、板式荧光读数仪等检测设备。通常,CY3以NHS酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)形式提供,能与蛋白表面的游离胺基高效形成稳定的酰胺键。
制备工艺
溶液制备
将BSA溶解于适宜的缓冲液中,常用PBS(pH 7.4)或碳酸盐缓冲液,浓度一般控制在1–5 mg/mL范围,以保证蛋白质的稳定性与反应效率。
CY3-NHS酯一般溶解于少量DMSO或DMF中,配制成适当浓度的溶液备用。
偶联反应
将溶解好的CY3-NHS酯缓慢滴加至BSA溶液中,维持反应体系的pH约7.2–7.8,有利于酰胺键形成。
反应过程通常在避光环境下于室温进行,反应时间为1至2小时,以保证充分结合同时避免蛋白质变性。
CY3的加入比例(摩尔比)可根据实验需求调节,通常控制在1:1至10:1之间,以调节标记密度,平衡荧光强度与蛋白活性。
纯化步骤
反应结束后,采用透析、凝胶过滤(如Sephadex G-25)或超滤技术去除未结合的游离CY3分子和有机溶剂残留,避免干扰后续应用。
纯化后的CY3-BSA溶液可进行浓缩处理,并在低温避光条件下保存,通常在4°C条件下稳定数周。
产品名称:CY3牛血清白蛋白 CY3-BSA
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23