CY3转铁蛋白 CY3-Transferrins的分子组成与结构特征
CY3转铁蛋白(CY3-Transferrin)是将天然转铁蛋白(Transferrin, Tf)与氰ine类染料CY3通过共价键偶联得到的荧光标记蛋白,广泛应用于细胞摄取机制研究、受体介导的内吞分析、纳米载体靶向验证以及荧光成像等实验。该复合物融合了转铁蛋白的特异性识别能力与CY3的荧光可视化特性,是研究转运过程与分子动力学的重要工具之一。
分子组成与结构特征:
转铁蛋白是一种由679个氨基酸组成的球状糖蛋白,分子量约为80 kDa,含有两个可结合三价铁离子的结合位点。它主要负责将铁从血液转运至细胞内,并通过特定的受体(Transferrin receptor, TfR)介导胞吞过程。蛋白分子中存在多个赖氨酸残基,可作为活性位点与荧光染料反应。
CY3是一类具有共轭π电子系统的氰ine荧光染料,激发波长通常在550 nm左右,发射波长约为570 nm,发出橙红色荧光。其光稳定性良好,荧光强度高,适用于多种生物成像平台,包括共聚焦显微镜、激光扫描显微镜及荧光扫描仪等。
合成方法:
CY3转铁蛋白的制备一般通过CY3-NHS酯与转铁蛋白中赖氨酸残基上的伯胺发生酰胺键偶联反应完成。具体步骤包括:
将CY3-NHS酯溶解于DMSO或无水DMF中。
将转铁蛋白溶于碳酸盐缓冲液(pH 8.3),以提供碱性条件促进酰胺键形成。
缓慢滴加CY3-NHS酯至转铁蛋白溶液中,轻柔混匀,反应一般在室温避光条件下进行30分钟至2小时。
反应结束后,通过透析或凝胶过滤柱(如Sephadex G-25)去除未反应的染料。
产物可进一步通过紫外-可见光谱和荧光光谱确认标记效率,并计算染料/蛋白的摩尔比(D/P比)。
理化性质与表征:
荧光特性:激发波长约550 nm,发射波长约570 nm,信号亮度适中。
蛋白结构:经标记后蛋白的空间构象基本不变,可保留其与TfR的结合能力。
稳定性:在避光、低温(4°C)条件下可稳定保存数周,冻干后在-20°C以下可长期保存。
表征方法:采用紫外吸收光谱(280 nm和550 nm)检测蛋白与染料含量;使用SDS-PAGE检查蛋白完整性;利用荧光光谱仪测定其发射强度及稳定性。
产品名称:CY3转铁蛋白 CY3-Transferrins
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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