英文名 NHS-SS-biotin
CAS号 122266-55-1
分子量 606.69
分子式 C19H28N4O6S3
结构特点
Biotin SS NHS 是一种带有生物素(Biotin)功能基团的交联剂,其结构中特别包含了:
生物素(Biotin):一种天然的维生素,具有亲和力和特异性结合能力,尤其能与亲和素(streptavidin)或链霉亲和素(avidin)强烈结合,形成高稳定性的非共价复合物。
NHS活性酯(N-hydroxysuccinimide ester):一个高效活泼的化学活性基团,能与含游离氨基(-NH2)的分子或材料进行快速共价偶联,形成稳定的酰胺键。
二硫键(Disulfide linker, SS):作为连接生物素与NHS活性酯的桥梁,含有一个可被还原断裂的二硫键,这一特性使得该交联剂在生物化学实验中非常有用,便于偶联产物的可逆拆卸。
化学性质与反应机制
NHS酯活性
NHS酯部分能迅速与含游离氨基的分子(如蛋白质、肽链或其它含氨基的化合物)发生亲核取代反应,形成共价酰胺键,实现稳定的连接。
二硫键特性
二硫键是可被还原剂(如二硫苏糖醇DTT、巯基乙醇BME等)切断的连接键,提供了偶联分子的可控可逆性,有利于后续的结构解析、功能研究或蛋白复原。
稳定性
在非还原环境下,Biotin SS NHS偶联产物稳定,适合多种生化条件。
四、主要用途与应用
1. 蛋白质和多肽的标记
利用NHS酯与蛋白质赖氨酸侧链氨基共价结合,将生物素引入蛋白分子中,实现高效生物素化。
生物素化后的蛋白质可以用于亲和素/链霉亲和素介导的纯化、捕获和检测技术。
2. 亲和纯化与免疫检测
通过生物素与亲和素的强亲和力,实现对目标分子的高选择性捕获和纯化。
结合二硫键的可逆性,可以在纯化后通过还原断裂二硫键,释放纯化产物,增强实验的灵活性。
3. 生物分子交联及多功能探针构建
适用于构建带有可还原二硫键连接的多功能生物探针。
可在细胞标记、分子识别、蛋白质相互作用研究等多种实验中发挥作用。
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