氨基蝶呤修饰蒿甲醚脂质体的制备及理化性质研究
氨基蝶呤修饰蒿甲醚脂质体供试品溶液的制备
精密称取物质的量比为88∶3.5∶3∶3的EPC、Chol、TPGS、APGA-PEG-DSPE和蒿甲醚（脂材-蒿甲醚20∶1）适量，于100 mL茄型瓶中，加入三氯甲烷溶解，40 ℃水浴条件下旋转干燥成膜，加入4 mL磷酸盐缓冲溶液（137 mmol/L NaCl，2.7 mmol/L KCl，8 mmol/L Na2HPO4，2 mmol/L KH2PO4，PBS，pH 7.4）溶液水化，先在水浴中超声1min，至形成乳白色均匀的粗脂质体后探头超声10 min（超声工作时间为10 s，间歇时间为10 s），保护温度为20 ℃，功率为200 W，然后将超声波粉碎后的脂质体囊泡挤压通过孔径为400、200 nm的聚碳酯膜各3次，制得带有蓝色乳光的半透明氨基蝶呤修饰的蒿甲醚脂质体。精密吸取脂质体样品0.1 mL，加0.9 mL乙腈超声破膜，过0.45 μm微孔滤膜，滤过，取续滤液，即得含药脂质体供试品溶液。
氨基蝶呤修饰蒿甲醚脂质体理化性质初步研究
1.粒度及Zeta电位 使用马尔文Zetasizer Nano-90激光粒度仪测定脂质体的粒径。仪器的激光束波长设定为633 nm，入射光与散射光束的夹角为90°，测定温度设定为25 ℃。取适量载药脂质体适当稀释后进行测定，测得氨基蝶呤修饰的蒿甲醚脂质体的粒径分别为98.23、101.56、100.12 nm，平均粒径为（99.97±1.67）nm，RSD为1.67%；多分散度（PDI）分别为0.205、0.187、0.163，平均PDI为0.185±0.021；Zeta电位为−0.113、0.039、0.005 mV，平均Zeta电位（−0.023±0.080）mV。
2.形态学 采用TEM进一步研究蒿甲醚脂质体的形态。使用去离子水作为分散介质稀释脂质体，用0.2 μm微孔滤膜滤过后，将铺有碳膜的铜网漂放在脂质体溶液上，1 min后取出，用滤纸吸干后，将俘获有脂质体粒子的铜网漂放在1%醋酸双氧铀水溶液上，1 min后取出，用滤纸吸干。室温放置过夜后，使用TEM在120 kV下进行观察。由下图可知，脂质体形态圆整。
3.体外释放,将氨基蝶呤修饰的蒿甲醚脂质体放在含血清蛋白的释放介质（含10%胎牛血清的PBS缓冲液）中进行体外释放实验。取1 mL脂质体，加入1 mL释放介质混匀后放入透析袋内，两端扎紧后将透析袋置于20.0 mL释放介质中，在37 ℃、100 r/min的条件下在摇床上振荡。分别于0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24、48 h，取出0.2 mL释放介质，并每次取样后立即补入同等体积的新鲜释放介质，经乙腈破膜、离心后，按“2.1.1”项下色谱条件进样分析，测定蒿甲醚的含量，按照公式计算氨基蝶呤修饰的蒿甲醚脂质体的体外累积释放率，结果见下图。
结果表明，蒿甲醚从脂质体中的释放率，在最初的2 h内，累积释放率为（21.95±2.29）%，24 h累积释放率为（51.97±3.25）%，48 h累积释放率为（57.07±6.09）%。
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