常用名 BHQ-2 琥珀酰亚胺酯
英文名 BHQ2 NHS ester
CAS号 916753-62-3
分子量 603.59
密度 1.37±0.1 g/cm3(Predicted)
沸点 780.6±70.0 °C(Predicted)
分子式 C29H29N7O8
熔点 N/A
结构与功能特点
1. BHQ-2 基团简介
Black Hole Quencher 2(BHQ-2)是一种非荧光型猝灭剂(Quencher),它能够通过荧光共振能量转移(FRET)或静态猝灭机制有效地猝灭相邻荧光团的发射。
BHQ-2 特别适用于红光到近红外波段(~550–670 nm)的染料,如 Cy5、Texas Red、Alexa Fluor 594 等;
它不会自身发射荧光,因此可最大限度降低背景信号,提高探针的信噪比;
它的吸收光谱广而强,覆盖多个红色荧光团的发射波段。
2. NHS酯功能
NHS 酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)是蛋白质、寡核苷酸、小分子等常用的胺反应活性基团,能够与伯胺或仲胺基团(如赖氨酸侧链、N端氨基)快速偶联。
与胺反应条件温和,常在 pH 7.0–9.0 的缓冲液中进行;
反应迅速高效,形成稳定的酰胺键;
常用于染料、探针、聚合物等与蛋白、核酸的共价标记。
应用领域
1. 荧光探针设计
BHQ-2 NHS ester 是设计和合成荧光探针、传感器等的核心组分之一,特别适用于:
荧光分子探针(如FRET探针)
核酸探针(如TaqMan、Molecular Beacons)
蛋白质功能探针
分子识别分析试剂
它可以与染料标记配对,实现荧光“开/关”机制,用于检测生物分子间的反应、构象变化或酶活性。
2. 核酸技术与PCR探针
实时荧光定量PCR(qPCR) 中广泛使用 BHQ-2 作猝灭剂,配对 Cy5、Texas Red 等染料;
用于 Molecular Beacon(分子信标) 与 TaqMan 探针,通过空间接近/分离控制信号释放;
其非荧光性质提高实验精度,减少背景干扰。
3. 多通道荧光标记系统
BHQ-2 可与多个红区荧光染料配对,用于构建多通道检测系统、微阵列、流式细胞术等。
4. 酶反应监测
在设计底物探针(如酯酶、蛋白酶)中使用 BHQ-2 实现酶切位点激活荧光;
可监测酶活性、抑制剂筛选等。
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