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CY5.5-SBA,CY5.5标记大豆凝集素的合成步骤
发布时间:2025-08-07     作者:axc   分享到:

CY5.5-SBA,CY5.5标记大豆凝集素的合成步骤

CY5.5-SBA 是由大豆来源的植物凝集素——大豆凝集素(Soybean Agglutinin, SBA)与近红外荧光染料 CY5.5 通过共价连接方式标记而成的荧光探针。SBA 是一种糖结合蛋白,特异性识别N-乙酰半乳糖胺结构,用于糖链研究和细胞标记。将其与CY5.5标记后,可赋予其近红外荧光特性,适用于深层组织成像及糖链分布可视化研究。

CY5.5-SBA 的合成主要利用SBA分子表面存在的赖氨酸残基上的伯胺,与CY5.5的活性NHS酯反应形成稳定的酰胺键。合成步骤如下:

缓冲液准备:将SBA溶解于pH 8.3的碳酸氢钠缓冲液中(通常浓度在1–2 mg/mL),该pH条件有利于胺基去质子化,从而增强反应活性。

CY5.5-NHS酯溶解与反应:将CY5.5-NHS ester溶于少量无水DMSO或DMF中,缓慢滴加至SBA溶液中。为了控制标记程度,染料与SBA的摩尔比通常设置在1:3至1:10之间。反应在避光条件下于室温搅拌2小时。

终止反应与纯化:反应结束后,可加入少量甘氨酸或Tris以封闭未反应的NHS酯残基。之后使用凝胶过滤(如Sephadex G-25)或超滤离心管(10 kDa截留)进行分离,去除游离染料。

产物表征:标记后的SBA溶液呈紫红色,可通过紫外-可见吸收光谱确认CY5.5的吸收峰(约675 nm),发射峰约695–710 nm。使用SDS-PAGE可确认蛋白完整性未受破坏,并通过BCA或Bradford方法定量蛋白浓度。

荧光度计算:可通过光谱积分分析染料与蛋白的结合率(D/P ratio),判断标记成功与否并优化反应条件。

CY5.5-SBA 可用于细胞膜糖链的近红外成像、肿瘤微环境模型构建以及糖相关细胞识别机制的动态观察研究,是一种稳定、高灵敏度的荧光糖链探针。

产品名称:CY5.5-SBA,CY5.5标记大豆凝集素

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

CY5.5-SBA

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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