CY5.5-sucrose,CY5.5标记蔗糖在反应过程中的注意事项
CY5.5-Sucrose 是将近红外荧光染料 CY5.5 与二糖蔗糖(Sucrose)通过化学修饰方式偶联而成的荧光标记碳水化合物探针。其应用于糖转运机制研究、植物营养动态可视化、糖受体识别、代谢成像等实验领域。该标记过程的核心在于保留蔗糖分子的识别与代谢活性,同时赋予其近红外可检测特性。CY5.5-sucrose 的反应机理具有一定的挑战性,因为蔗糖分子本身缺乏直接与染料发生共价偶联的反应官能团。
蔗糖是由 α-D-葡萄糖与 β-D-果糖通过 α(1→2) 糖苷键连接而成的非还原性二糖,分子中不含游离醛基或酮基,且所有羟基团均为次级醇。因此,要与CY5.5形成共价连接,需引入可反应的中间基团。其反应机理一般分为两步:蔗糖的功能化修饰与染料偶联反应。
蔗糖功能化改造:为实现共价标记,需先将蔗糖分子引入可反应的胺基。常用方法包括通过环氧化物、羧酸活化剂或酰氯类与蔗糖的羟基反应,引入胺基团。例如可通过异氰酸酯或碳二亚胺化合物(如EDC/NHS)将氨丙基胺连接至蔗糖上,从而形成蔗糖-胺中间体(Sucrose-NH₂)。另一常见方法是通过肟化或还原胺反应在果糖端修饰一个胺功能基。
染料偶联反应:将CY5.5-NHS酯与蔗糖胺衍生物在碱性条件下(pH 8.0–8.5)反应,NHS酯与胺基发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键,生成终的CY5.5-sucrose产物。
该反应机理的本质是通过人工引入的胺功能团来“桥接”不具有反应活性的蔗糖分子与染料的活性酯结构。由于蔗糖分子结构中无特异位点,该修饰一般发生在某一边链羟基位点,反应具有一定区域选择性,但难以完全控制单一位点标记。
反应过程中注意以下关键点:
CY5.5-NHS 酯需在无水DMSO中现配现用,避免水解;
蔗糖-胺中间体的制备需要脱盐纯化,确保反应不受杂质干扰;
控制染料与蔗糖胺的摩尔比(1.5:1至3:1)有助于获得单一标记产物;
终产物可通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)或质谱分析确认其纯度与分子质量;
近红外吸收峰(CY5.5 λmax ~675 nm)可作为标记成功的指示。
产品名称:CY5.5-sucrose,CY5.5标记蔗糖
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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