产品名称：HRP-Alkyne，辣根过氧化物酶-炔基的化学结构与合成方法

化学结构与合成

1.1 化学结构

分子组成：

HRP部分：辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）是一种含铁原卟啉的糖蛋白，分子量约44,000道尔顿，由无色酶蛋白和棕色铁卟啉（辅基）组成，具有催化过氧化氢氧化底物的活性。

炔基部分：炔基（如乙炔基或更长的碳链三键结构）通过点击化学反应（如与叠氮基团结合）实现特异性标记，通常连接在HRP的氨基或巯基上。

连接方式：炔基的异硫氰酸酯或N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS酯）与HRP的氨基反应，形成稳定的硫脲键或酰胺键。

1.2 合成方法

试剂准备：

HRP溶解于磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.4-8.0）。

炔基化合物（如炔基琥珀酰亚胺酯）溶解于有机溶剂（如DMSO）。

反应条件：

将炔基化合物缓慢加入HRP溶液中，室温避光反应4-6小时，通过控制摩尔比（通常1:1至1:5）调节标记程度。

纯化：

通过透析（MWCO 3500-10000 Da）或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的炔基和副产物，冻干后得到固体粉末，纯度≥95%（通过SDS-PAGE和酶活性分析验证）。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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