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FITC-insulin,异硫氰酸酯荧光素-重组人胰岛素的合成方法:氨基反应偶联策略
发布时间:2025-08-13     作者:wyh   分享到:

产品名称:FITC-insulin,异硫氰酸酯荧光素-重组人胰岛素

1. 功能特性:荧光示踪+降血糖活性的双重优势

荧光示踪能力:

FITC提供实时、可视化的荧光信号,适用于细胞或浅层组织成像(如胰岛β细胞、肌肉/脂肪组织),可追踪胰岛素在细胞内的分布、代谢及与受体的相互作用,降低背景干扰,提升信噪比。

胰岛素的降血糖活性:

胰岛素通过与胰岛素受体(IR)结合,激活PI3K-Akt信号通路,促进葡萄糖转运体(GLUT4)转位至细胞膜,加速葡萄糖摄取(如肌肉、脂肪细胞)及肝糖原合成,同时抑制肝糖原分解和糖异生。标记后需保留其与IR的结合能力及降血糖活性。

生物相容性:

FITC和胰岛素均为生物兼容性分子,但需验证探针整体在体内的代谢(如FITC是否脱落)、毒性(如长期蓄积)及对胰岛素活性的影响(如标记是否破坏二硫键或受体结合位点)。

FITC-insulin,异硫氰酸酯荧光素-重组人胰岛素

2. 合成方法:氨基反应偶联策略

FITC-Insulin的合成通常采用分步偶联法,关键步骤如下:

胰岛素的预处理:

重组人胰岛素粉末溶解于碳酸盐缓冲液(pH 9.0-9.5),调整浓度至1-5 mg/mL,确保氨基充分暴露(碱性环境提升FITC反应效率)。

FITC的活化与偶联:

FITC粉末溶解于DMSO中,缓慢滴加至胰岛素溶液中,室温避光搅拌反应2-4小时。FITC的异硫氰酸基团与胰岛素的氨基反应,形成硫代氨基甲酸酯键。

反应式:Insulin-NH₂ + FITC-N=C=S → Insulin-NH-C(=S)-FITC

纯化与表征:

反应液通过透析(MWCO 3-5 kDa)或超滤(10 kDa cutoff)去除未反应的FITC和小分子副产物,冷冻干燥得到FITC-Insulin粉末。通过紫外-可见光谱(UV-Vis)(FITC特征吸收峰495 nm)和荧光光谱(激发波长495 nm,发射波长520 nm)验证标记效率,通过SDS-PAGE或质谱(MS)分析胰岛素的分子量及纯度。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh


西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。

FITC-insulin,异硫氰酸酯荧光素-重组人胰岛素

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