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FITC-MTX,异硫氰酸荧光素-甲氨喋呤的制备关键步骤
发布时间:2025-08-14     作者:wyh   分享到:

产品名称:FITC-MTX,异硫氰酸荧光素-甲氨喋呤的制备关键步骤

FITC-MTX的制备方法

FITC-MTX的制备通常涉及以下关键步骤:

MTX的准备:

从商业来源获取高纯度的MTX样品,并通过高效液相色谱(HPLC)或薄层色谱(TLC)等方法验证其纯度。

测定MTX的浓度,通常使用紫外-可见分光光度计或HPLC等方法。

FITC的活化:

FITC通常以粉末形式提供,使用前需要将其溶解在适当的溶剂(如二甲基亚砜,DMSO)中,以制备成一定浓度的FITC溶液。

在某些情况下,可能需要对FITC进行进一步的纯化或活化处理,以提高其反应效率。

FITC与MTX的偶联反应:

将活化的FITC溶液与MTX在适当的缓冲液(如磷酸盐缓冲液,PBS,pH 7.2-7.4)中混合。

在温和搅拌下,于室温或低温(如4℃)下反应数小时至过夜,以确保FITC与MTX充分结合。

反应过程中可以加入适量的催化剂(如三乙胺)或调整反应pH值以提高反应效率。但需注意控制反应条件,以避免对MTX的生物活性产生不利影响。

纯化与鉴定:

反应结束后,通过透析、超滤或凝胶过滤层析等方法去除未结合的FITC和其他杂质,得到纯化的FITC-MTX复合物。

利用紫外-可见分光光度计测定FITC-MTX的吸收光谱,确认FITC已成功标记到MTX上。

通过HPLC或质谱(MS)等方法进一步鉴定FITC-MTX的纯度和分子量。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

FITC-MTX,异硫氰酸荧光素-甲氨喋呤

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